アフリカツメガエル - 版の履歴

2025年3月14日 (金) 00:28にWikiSysopによる

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	<font size="+1">[~~http~~://researchmap.jp/~~read0053524~~ 上野直人]</font><br>		<font size="+1">[https://researchmap.jp/nueno_9648 上野直人]</font><br>
	''基礎生物学研究所 ~~発生生物学領域岡崎国立共同研究機構 (基礎生物学研究所) 発生生物学研究系~~''<br>		''自然科学研究機構基礎生物学研究所''<br>
	DOI：<selfdoi />　原稿受付日：2012年5月11日　原稿完成日：2012年7月5日<br>		DOI：<selfdoi />　原稿受付日：2012年5月11日　原稿完成日：2012年7月5日<br>
	担当編集委員：[http://researchmap.jp/noriko1128 大隅典子]（東北大学大学院医学系研究科附属創生応用医学研究センター脳神経科学コアセンター発生発達神経科学分野）<br>		担当編集委員：[http://researchmap.jp/noriko1128 大隅典子]（東北大学大学院医学系研究科附属創生応用医学研究センター脳神経科学コアセンター発生発達神経科学分野）<br>

WikiSysop: /* 卵母細胞発現系 */

2021-12-15T11:30:05Z

卵母細胞発現系

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	=== 卵母細胞発現系 ===		=== 卵母細胞発現系 ===

	神経科学においては、アフリカツメガエル[[wj:卵母細胞\|卵母細胞]]は[[wj:タンパク質\|タンパク質]][[wj:翻訳\|翻訳]]系として用いられてきた。とくに1980年代になって[[wikipedia:SP6 RNA polymerase\|SP6]][[プロモーター]]を用いて特定の[[wj:cDNA\|cDNA]]から[[~~wj:mRNA\|~~mRNA]]を合成することが可能になった<ref name=ref2><pubmed>6091052</pubmed></ref>こともあり、[[wj:未受精卵\|未受精卵]]および胚内へのmRNAの顕微注入により発現させた機能タンパク質の生物活性評価に用いられている。とく卵母細胞での[[wj:膜タンパク質\|膜タンパク質]]の翻訳と[[パッチクランプ法]]などの電気生理実験を組み合わせて[[アセチルコリン受容体]]<ref name=ref3><pubmed>2843772</pubmed></ref>を含む多くの重要な[[受容体]]、[[チャネル]]分子の同定がなされている（図左）。同様の手法を用いて、mRNAプールからの発現クローニングも可能である<ref name=ref4><pubmed>2770868</pubmed></ref>。		神経科学においては、アフリカツメガエル[[wj:卵母細胞\|卵母細胞]]は[[wj:タンパク質\|タンパク質]][[wj:翻訳\|翻訳]]系として用いられてきた。とくに1980年代になって[[wikipedia:SP6 RNA polymerase\|SP6]][[プロモーター]]を用いて特定の[[wj:cDNA\|cDNA]]から[[mRNA]]を合成することが可能になった<ref name=ref2><pubmed>6091052</pubmed></ref>こともあり、[[wj:未受精卵\|未受精卵]]および胚内へのmRNAの顕微注入により発現させた機能タンパク質の生物活性評価に用いられている。とく卵母細胞での[[wj:膜タンパク質\|膜タンパク質]]の翻訳と[[パッチクランプ法]]などの電気生理実験を組み合わせて[[アセチルコリン受容体]]<ref name=ref3><pubmed>2843772</pubmed></ref>を含む多くの重要な[[受容体]]、[[チャネル]]分子の同定がなされている（図左）。同様の手法を用いて、mRNAプールからの発現クローニングも可能である<ref name=ref4><pubmed>2770868</pubmed></ref>。

	[[Image:Xenopus Fig1.jpg\|thumb\|250px\|'''図　卵母細胞発現系による機能解析'''<br>図は森田仁博士による。]]		[[Image:Xenopus Fig1.jpg\|thumb\|250px\|'''図　卵母細胞発現系による機能解析'''<br>図は森田仁博士による。]]

	=== 発生 ===		=== 発生 ===

2020年1月9日 (木) 03:43にWikiSysopによる

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	{{box\|text=		{{box\|text=
	アフリカ原産の[[wj:カエル\|カエル]]（[[wj:両生類\|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[wj:ヒト\|ヒト]][[wj:絨毛性ゴナドトロピン\|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[wj:排卵\|排卵]]することから[[wj:妊娠\|妊娠]]検査に用いられていたが、[[wj:卵\|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[wj:胚\|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[wj:ネッタイツメガエル:ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[wj:染色体\|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[wj:ゲノム\|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。		アフリカ原産の[[wj:カエル\|カエル]]（[[wj:両生類\|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[wj:ヒト\|ヒト]][[wj:絨毛性ゴナドトロピン\|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[wj:排卵\|排卵]]することから[[wj:妊娠\|妊娠]]検査に用いられていたが、[[wj:卵\|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[wj:胚\|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[wj:ネッタイツメガエル\|ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[wj:染色体\|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[wj:ゲノム\|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。
	}}		}}

2020年1月9日 (木) 03:43にWikiSysopによる

2020-01-09T03:43:17Z

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	{{box\|text=		{{box\|text=
	アフリカ原産の[[wj:カエル\|カエル]]（[[wj:両生類\|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[wj:ヒト\|ヒト]][[wj:絨毛性ゴナドトロピン\|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[wj:排卵\|排卵]]することから[[wj:妊娠\|妊娠]]検査に用いられていたが、[[wj:卵\|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[wj:胚\|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[wj:ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[wj:染色体\|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[wj:ゲノム\|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。		アフリカ原産の[[wj:カエル\|カエル]]（[[wj:両生類\|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[wj:ヒト\|ヒト]][[wj:絨毛性ゴナドトロピン\|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[wj:排卵\|排卵]]することから[[wj:妊娠\|妊娠]]検査に用いられていたが、[[wj:卵\|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[wj:胚\|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[wj:ネッタイツメガエル:ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[wj:染色体\|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[wj:ゲノム\|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。
	}}		}}

2020年1月9日 (木) 03:42にWikiSysopによる

2020-01-09T03:42:34Z

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	{{box\|text=		{{box\|text=
	アフリカ原産の[[~~wikipedia:ja~~:カエル\|カエル]]（[[~~wikipedia:ja~~:両生類\|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[~~wikipedia:ja~~:ヒト\|ヒト]][[~~wikipedia:ja~~:絨毛性ゴナドトロピン\|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[~~wikipedia:ja~~:排卵\|排卵]]することから[[~~wikipedia:ja~~:妊娠\|妊娠]]検査に用いられていたが、[[~~wikipedia:ja~~:卵\|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[~~wikipedia:ja~~:胚\|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[~~wikipedia~~:~~Western clawed frog\|~~ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[~~wikipedia:ja~~:染色体\|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[~~wikipedia:ja~~:ゲノム\|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。		アフリカ原産の[[wj:カエル\|カエル]]（[[wj:両生類\|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[wj:ヒト\|ヒト]][[wj:絨毛性ゴナドトロピン\|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[wj:排卵\|排卵]]することから[[wj:妊娠\|妊娠]]検査に用いられていたが、[[wj:卵\|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[wj:胚\|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[wj:ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[wj:染色体\|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[wj:ゲノム\|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。
	}}		}}

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	=== 卵母細胞発現系 ===		=== 卵母細胞発現系 ===

	神経科学においては、アフリカツメガエル[[~~wikipedia:ja~~:卵母細胞\|卵母細胞]]は[[~~wikipedia:ja~~:タンパク質\|タンパク質]][[~~wikipedia:ja~~:翻訳\|翻訳]]系として用いられてきた。とくに1980年代になって[[wikipedia:SP6 RNA polymerase\|SP6]][[プロモーター]]を用いて特定の[[~~wikipedia:ja~~:cDNA\|cDNA]]から[[~~wikipedia:ja~~:mRNA\|mRNA]]を合成することが可能になった<ref name=ref2><pubmed>6091052</pubmed></ref>こともあり、[[~~wikipedia:ja~~:未受精卵\|未受精卵]]および胚内へのmRNAの顕微注入により発現させた機能タンパク質の生物活性評価に用いられている。とく卵母細胞での[[~~wikipedia:ja~~:膜タンパク質\|膜タンパク質]]の翻訳と[[パッチクランプ法]]などの電気生理実験を組み合わせて[[アセチルコリン受容体]]<ref name=ref3><pubmed>2843772</pubmed></ref>を含む多くの重要な[[受容体]]、[[チャネル]]分子の同定がなされている（図左）。同様の手法を用いて、mRNAプールからの発現クローニングも可能である<ref name=ref4><pubmed>2770868</pubmed></ref>。		神経科学においては、アフリカツメガエル[[wj:卵母細胞\|卵母細胞]]は[[wj:タンパク質\|タンパク質]][[wj:翻訳\|翻訳]]系として用いられてきた。とくに1980年代になって[[wikipedia:SP6 RNA polymerase\|SP6]][[プロモーター]]を用いて特定の[[wj:cDNA\|cDNA]]から[[wj:mRNA\|mRNA]]を合成することが可能になった<ref name=ref2><pubmed>6091052</pubmed></ref>こともあり、[[wj:未受精卵\|未受精卵]]および胚内へのmRNAの顕微注入により発現させた機能タンパク質の生物活性評価に用いられている。とく卵母細胞での[[wj:膜タンパク質\|膜タンパク質]]の翻訳と[[パッチクランプ法]]などの電気生理実験を組み合わせて[[アセチルコリン受容体]]<ref name=ref3><pubmed>2843772</pubmed></ref>を含む多くの重要な[[受容体]]、[[チャネル]]分子の同定がなされている（図左）。同様の手法を用いて、mRNAプールからの発現クローニングも可能である<ref name=ref4><pubmed>2770868</pubmed></ref>。

	[[Image:Xenopus Fig1.jpg\|thumb\|250px\|'''図　卵母細胞発現系による機能解析'''<br>図は森田仁博士による。]]		[[Image:Xenopus Fig1.jpg\|thumb\|250px\|'''図　卵母細胞発現系による機能解析'''<br>図は森田仁博士による。]]
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	=== 発生 ===		=== 発生 ===

	一方、アフリカツメガエルは[[初期発生]]における[[細胞分化]]、[[形態形成]]の研究においても発展に大きく寄与しており、神経科学への貢献も無視できない。1920年代に[[wikipedia:Hans Spemann\|Hans Spemann]]は両生類である[[~~wikipedia:ja~~:サンショウウオ\|サンショウウオ]]初期[[~~wikipedia:ja~~:原腸胚\|原腸胚]]の[[オーガナイザー領域]]（[[原口背唇部]]）を腹側に移植すると、頭部など[[中枢神経系]]が重複した2次胚ができることを発見し[[神経誘導因子]]の存在を予見した<ref name=ref5>'''Spemann, H., and Mangold, H.'''<br>Roux Arch. f. Entw. mech. 100,599-638, 1924</ref>。この神経誘導因子の同定にアフリカツメガエル胚を用いた実験は重要な役割を果たした。		一方、アフリカツメガエルは[[初期発生]]における[[細胞分化]]、[[形態形成]]の研究においても発展に大きく寄与しており、神経科学への貢献も無視できない。1920年代に[[wikipedia:Hans Spemann\|Hans Spemann]]は両生類である[[wj:サンショウウオ\|サンショウウオ]]初期[[wj:原腸胚\|原腸胚]]の[[オーガナイザー領域]]（[[原口背唇部]]）を腹側に移植すると、頭部など[[中枢神経系]]が重複した2次胚ができることを発見し[[神経誘導因子]]の存在を予見した<ref name=ref5>'''Spemann, H., and Mangold, H.'''<br>Roux Arch. f. Entw. mech. 100,599-638, 1924</ref>。この神経誘導因子の同定にアフリカツメガエル胚を用いた実験は重要な役割を果たした。

	mRNAの顕微注入による機能評価が可能であることから、1990年代には移植実験の代わりにmRNAを腹側の[[~~wikipedia:ja~~:割球\|割球]]にだけ注入するという実験が行われ（図右）、[[骨形成タンパク質]]（bone moephogenetic protein, BMP）シグナルを遮断する[[ドミナントネガティブ]]受容体<ref name=ref6><pubmed>7937936</pubmed></ref>やオーガナイザー領域で発現する[[BMP活性阻害因子]]（[[ノギン]]<ref name=ref7><pubmed>8752214</pubmed></ref>、[[コーディン]]<ref name=ref8><pubmed>8752213</pubmed></ref>、[[フォリスタチン]]）<ref name=ref9><pubmed>9689081</pubmed></ref>がオーガナイザー同様に2次軸形成能をもつことが明らかにされ、神経誘導活性をもつオーガナイザー因子の存在が分子同定によって明らかになった。		mRNAの顕微注入による機能評価が可能であることから、1990年代には移植実験の代わりにmRNAを腹側の[[wj:割球\|割球]]にだけ注入するという実験が行われ（図右）、[[骨形成タンパク質]]（bone moephogenetic protein, BMP）シグナルを遮断する[[ドミナントネガティブ]]受容体<ref name=ref6><pubmed>7937936</pubmed></ref>やオーガナイザー領域で発現する[[BMP活性阻害因子]]（[[ノギン]]<ref name=ref7><pubmed>8752214</pubmed></ref>、[[コーディン]]<ref name=ref8><pubmed>8752213</pubmed></ref>、[[フォリスタチン]]）<ref name=ref9><pubmed>9689081</pubmed></ref>がオーガナイザー同様に2次軸形成能をもつことが明らかにされ、神経誘導活性をもつオーガナイザー因子の存在が分子同定によって明らかになった。

	[[~~wikipedia:ja~~:胞胚期\|胞胚期]]の[[動物極]]側細胞集団（[[アニマルキャップ]]）は誘導因子の非存在下では[[wikipedia:ja表皮\|表皮]]分化するが、解離して培養すると神経に分化することも知られていた。現在、アニマルキャップに存在するBMPが神経分化を抑制しており<ref name=ref10><pubmed>8898230</pubmed></ref>、その除去または活性阻害により神経分化が進むと解釈されている。このようにアフリカツメガエルは簡便な神経分化の評価系として有効である。		[[wj:胞胚期\|胞胚期]]の[[動物極]]側細胞集団（[[アニマルキャップ]]）は誘導因子の非存在下では[[wikipedia:ja表皮\|表皮]]分化するが、解離して培養すると神経に分化することも知られていた。現在、アニマルキャップに存在するBMPが神経分化を抑制しており<ref name=ref10><pubmed>8898230</pubmed></ref>、その除去または活性阻害により神経分化が進むと解釈されている。このようにアフリカツメガエルは簡便な神経分化の評価系として有効である。

	また、アフリカツメガエルは母胎外で発生するため、[[中枢神経系]]の初期形態形成を[[~~wikipedia:ja~~:\|実体顕微鏡]]下で直接観察できるという大きな利点がある。過剰発現による機能亢進、機能阻害を用いて、とくに[[神経管]]形成のしくみを細胞レベルで明らかにするために非常に適したモデル生物であり、[[神経管閉鎖不全]]などの病因・病態解明に寄与している。		また、アフリカツメガエルは母胎外で発生するため、[[中枢神経系]]の初期形態形成を[[wj:\|実体顕微鏡]]下で直接観察できるという大きな利点がある。過剰発現による機能亢進、機能阻害を用いて、とくに[[神経管]]形成のしくみを細胞レベルで明らかにするために非常に適したモデル生物であり、[[神経管閉鎖不全]]などの病因・病態解明に寄与している。

	=== 遺伝学研究 ===		=== 遺伝学研究 ===

	他のモデル生物に比べ遺伝学研究が遅れているが、[[遺伝子導入]]（[[トランスジェニック]]）は[[~~wikipedia:ja~~:精子\|精子]][[~~wikipedia:ja~~:核移植\|核移植]]を用いた[[REMI法]]（restriction enzyme-mediated integration）<ref name=ref10 />などにより多数の系統が作出されている。神経系への直接の影響を観察する神経科学においては遺伝子導入に[[電気穿孔法]]（electroporation）が用いられ、[[神経発生期]]での特定遺伝子の[[過剰発現]]による脳の形態異常や遺伝子発現変化などの解析で効果を挙げている。また、[[微小電極]]を用いて単一[[ニューロン]]あるいは[[グリア細胞]]へ遺伝子導入する方法も確立されている<ref name=ref11><pubmed>12147134</pubmed></ref>。遺伝子ばかりでなくタンパク質や[[蛍光デキストラン]]など標識化合物など電荷をもった分子を導入できことから高分解能での解析が可能となっている。		他のモデル生物に比べ遺伝学研究が遅れているが、[[遺伝子導入]]（[[トランスジェニック]]）は[[wj:精子\|精子]][[wj:核移植\|核移植]]を用いた[[REMI法]]（restriction enzyme-mediated integration）<ref name=ref10 />などにより多数の系統が作出されている。神経系への直接の影響を観察する神経科学においては遺伝子導入に[[電気穿孔法]]（electroporation）が用いられ、[[神経発生期]]での特定遺伝子の[[過剰発現]]による脳の形態異常や遺伝子発現変化などの解析で効果を挙げている。また、[[微小電極]]を用いて単一[[ニューロン]]あるいは[[グリア細胞]]へ遺伝子導入する方法も確立されている<ref name=ref11><pubmed>12147134</pubmed></ref>。遺伝子ばかりでなくタンパク質や[[蛍光デキストラン]]など標識化合物など電荷をもった分子を導入できことから高分解能での解析が可能となっている。

	機能阻害実験に関しては現時点で[[遺伝子破壊]]が不可能であり、[[アンチセンスモルフォリノオリゴヌクレオチド]]（MO）がいわゆる[[ノックダウン]]実験に用いられる。4倍体であるため遺伝子によってはノックダウン効率を高めるために、倍化によって生じた相同な遺伝子（ホメオログ）に対する2種類のMOを用いる必要があるが、MOによるノックダウン実験は一般的な方法となっている<ref name=ref12><pubmed>11477685</pubmed></ref> <ref name=ref13><pubmed>22222519</pubmed></ref>。とくに神経科学においては、16もしくは32細胞期の背側および動物極側割球に選択的にmRNAを注入することにより初期発生への影響を排除して中枢神経系への影響を観察できることはアフリカツメガエルの有利性のひとつである。		機能阻害実験に関しては現時点で[[遺伝子破壊]]が不可能であり、[[アンチセンスモルフォリノオリゴヌクレオチド]]（MO）がいわゆる[[ノックダウン]]実験に用いられる。4倍体であるため遺伝子によってはノックダウン効率を高めるために、倍化によって生じた相同な遺伝子（ホメオログ）に対する2種類のMOを用いる必要があるが、MOによるノックダウン実験は一般的な方法となっている<ref name=ref12><pubmed>11477685</pubmed></ref> <ref name=ref13><pubmed>22222519</pubmed></ref>。とくに神経科学においては、16もしくは32細胞期の背側および動物極側割球に選択的にmRNAを注入することにより初期発生への影響を排除して中枢神経系への影響を観察できることはアフリカツメガエルの有利性のひとつである。

2014年6月11日 (水) 15:08にWikiSysopによる

2014-06-11T15:08:35Z

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	神経科学においては、アフリカツメガエル[[wikipedia:ja:卵母細胞\|卵母細胞]]は[[wikipedia:ja:タンパク質\|タンパク質]][[wikipedia:ja:翻訳\|翻訳]]系として用いられてきた。とくに1980年代になって[[wikipedia:SP6 RNA polymerase\|SP6]][[プロモーター]]を用いて特定の[[wikipedia:ja:cDNA\|cDNA]]から[[wikipedia:ja:mRNA\|mRNA]]を合成することが可能になった<ref name=ref2><pubmed>6091052</pubmed></ref>こともあり、[[wikipedia:ja:未受精卵\|未受精卵]]および胚内へのmRNAの顕微注入により発現させた機能タンパク質の生物活性評価に用いられている。とく卵母細胞での[[wikipedia:ja:膜タンパク質\|膜タンパク質]]の翻訳と[[パッチクランプ法]]などの電気生理実験を組み合わせて[[アセチルコリン受容体]]<ref name=ref3><pubmed>2843772</pubmed></ref>を含む多くの重要な[[受容体]]、[[チャネル]]分子の同定がなされている（図左）。同様の手法を用いて、mRNAプールからの発現クローニングも可能である<ref name=ref4><pubmed>2770868</pubmed></ref>。		神経科学においては、アフリカツメガエル[[wikipedia:ja:卵母細胞\|卵母細胞]]は[[wikipedia:ja:タンパク質\|タンパク質]][[wikipedia:ja:翻訳\|翻訳]]系として用いられてきた。とくに1980年代になって[[wikipedia:SP6 RNA polymerase\|SP6]][[プロモーター]]を用いて特定の[[wikipedia:ja:cDNA\|cDNA]]から[[wikipedia:ja:mRNA\|mRNA]]を合成することが可能になった<ref name=ref2><pubmed>6091052</pubmed></ref>こともあり、[[wikipedia:ja:未受精卵\|未受精卵]]および胚内へのmRNAの顕微注入により発現させた機能タンパク質の生物活性評価に用いられている。とく卵母細胞での[[wikipedia:ja:膜タンパク質\|膜タンパク質]]の翻訳と[[パッチクランプ法]]などの電気生理実験を組み合わせて[[アセチルコリン受容体]]<ref name=ref3><pubmed>2843772</pubmed></ref>を含む多くの重要な[[受容体]]、[[チャネル]]分子の同定がなされている（図左）。同様の手法を用いて、mRNAプールからの発現クローニングも可能である<ref name=ref4><pubmed>2770868</pubmed></ref>。

	[[Image:~~スライド1~~.jpg\|thumb\|250px\|'''図　卵母細胞発現系による機能解析'''<br>図は森田仁博士による。]]		[[Image:Xenopus Fig1.jpg\|thumb\|250px\|'''図　卵母細胞発現系による機能解析'''<br>図は森田仁博士による。]]

	=== 発生 ===		=== 発生 ===

2014年6月3日 (火) 07:47にTfuruyaによる

2014-06-03T07:47:40Z

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	<font size="+1">[http://researchmap.jp/read0053524 上野直人]</font><br>		<font size="+1">[http://researchmap.jp/read0053524 上野直人]</font><br>
	''基礎生物学研究所発生生物学領域岡崎国立共同研究機構 (基礎生物学研究所) 発生生物学研究系''<br>		''基礎生物学研究所発生生物学領域岡崎国立共同研究機構 (基礎生物学研究所) 発生生物学研究系''<br>
	~~DOI XXXX~~/~~XXXX　原稿受付日：2012年5月11日　原稿完成日：2012年7月5日~~<br>		DOI：<selfdoi />　原稿受付日：2012年5月11日　原稿完成日：2012年7月5日<br>
	担当編集委員：[http://researchmap.jp/noriko1128 大隅典子]（東北大学大学院医学系研究科附属創生応用医学研究センター脳神経科学コアセンター発生発達神経科学分野）<br>		担当編集委員：[http://researchmap.jp/noriko1128 大隅典子]（東北大学大学院医学系研究科附属創生応用医学研究センター脳神経科学コアセンター発生発達神経科学分野）<br>
	</div>		</div>

2013年8月8日 (木) 04:40にTfuruyaによる

2013-08-08T04:40:56Z

@@ 1行目: / 1行目: @@
 {{Taxobox
 | name = African clawed frog
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 }} 学名：''Xenopus laevis''　英語名： African clawed frog　独：Afrikanischer Krallenfrosch　仏：xénope du Cap
 　アフリカ原産の[[wikipedia:ja:カエル|カエル]]（[[wikipedia:ja:両生類|両生類]]）。古くは妊婦の尿中に含まれる[[wikipedia:ja:ヒト|ヒト]][[wikipedia:ja:絨毛性ゴナドトロピン|絨毛性ゴナドトロピン]]（hCG）に応答し[[wikipedia:ja:排卵|排卵]]することから[[wikipedia:ja:妊娠|妊娠]]検査に用いられていたが、[[wikipedia:ja:卵|卵]]が比較的大きく（直径約1.2 mm）[[wikipedia:ja:胚|胚]]操作が容易であることから生物学、医学研究における[[モデル生物]]として世界に拡散し長い間重用されてきた。飼育は20℃前後で行われ比較的容易であるが、世代交代時間が1-2年と長く遺伝学には不向きとされている。近縁種の[[wikipedia:Western clawed frog|ネッタイツメガエル]]''Xenopus tropicalis''はアフリカツメガエルの[[wikipedia:ja:染色体|染色体]]が偽4倍体であるのに対して2倍体であること、最近[[wikipedia:ja:ゲノム|ゲノム]]解読が終了したことなどからネッタイツメガエルも近年遺伝学を可能にする両生類モデル生物として拡大しつつある<ref name=ref1><pubmed>21963197</pubmed></ref>。
 == 神経科学に於ける利用  ==
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 <references />

WikiSysop: /* 遺伝学研究 */

2012-09-30T06:55:39Z

遺伝学研究

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	=== 遺伝学研究 ===		=== 遺伝学研究 ===

	他のモデル生物に比べ遺伝学研究が遅れているが、[[遺伝子導入]]（[[トランスジェニック]]）は[[wikipedia:ja:精子\|精子]][[wikipedia:ja:核移植\|核移植]]を用いた[[REMI法]]（restriction enzyme-mediated integration）<ref name=ref10 />などにより多数の系統が作出されている。神経系への直接の影響を観察する神経科学においては遺伝子導入に[[~~電気窄孔法~~]]（electroporation）が用いられ、[[神経発生期]]での特定遺伝子の[[過剰発現]]による脳の形態異常や遺伝子発現変化などの解析で効果を挙げている。また、[[微小電極]]を用いて単一[[ニューロン]]あるいは[[グリア細胞]]へ遺伝子導入する方法も確立されている<ref name=ref11><pubmed>12147134</pubmed></ref>。遺伝子ばかりでなくタンパク質や[[蛍光デキストラン]]など標識化合物など電荷をもった分子を導入できことから高分解能での解析が可能となっている。		他のモデル生物に比べ遺伝学研究が遅れているが、[[遺伝子導入]]（[[トランスジェニック]]）は[[wikipedia:ja:精子\|精子]][[wikipedia:ja:核移植\|核移植]]を用いた[[REMI法]]（restriction enzyme-mediated integration）<ref name=ref10 />などにより多数の系統が作出されている。神経系への直接の影響を観察する神経科学においては遺伝子導入に[[電気穿孔法]]（electroporation）が用いられ、[[神経発生期]]での特定遺伝子の[[過剰発現]]による脳の形態異常や遺伝子発現変化などの解析で効果を挙げている。また、[[微小電極]]を用いて単一[[ニューロン]]あるいは[[グリア細胞]]へ遺伝子導入する方法も確立されている<ref name=ref11><pubmed>12147134</pubmed></ref>。遺伝子ばかりでなくタンパク質や[[蛍光デキストラン]]など標識化合物など電荷をもった分子を導入できことから高分解能での解析が可能となっている。

	機能阻害実験に関しては現時点で[[遺伝子破壊]]が不可能であり、[[アンチセンスモルフォリノオリゴヌクレオチド]]（MO）がいわゆる[[ノックダウン]]実験に用いられる。4倍体であるため遺伝子によってはノックダウン効率を高めるために、倍化によって生じた相同な遺伝子（ホメオログ）に対する2種類のMOを用いる必要があるが、MOによるノックダウン実験は一般的な方法となっている<ref name=ref12><pubmed>11477685</pubmed></ref> <ref name=ref13><pubmed>22222519</pubmed></ref>。とくに神経科学においては、16もしくは32細胞期の背側および動物極側割球に選択的にmRNAを注入することにより初期発生への影響を排除して中枢神経系への影響を観察できることはアフリカツメガエルの有利性のひとつである。		機能阻害実験に関しては現時点で[[遺伝子破壊]]が不可能であり、[[アンチセンスモルフォリノオリゴヌクレオチド]]（MO）がいわゆる[[ノックダウン]]実験に用いられる。4倍体であるため遺伝子によってはノックダウン効率を高めるために、倍化によって生じた相同な遺伝子（ホメオログ）に対する2種類のMOを用いる必要があるが、MOによるノックダウン実験は一般的な方法となっている<ref name=ref12><pubmed>11477685</pubmed></ref> <ref name=ref13><pubmed>22222519</pubmed></ref>。とくに神経科学においては、16もしくは32細胞期の背側および動物極側割球に選択的にmRNAを注入することにより初期発生への影響を排除して中枢神経系への影響を観察できることはアフリカツメガエルの有利性のひとつである。

WikiSysop: /* 遺伝学研究 */

2012-09-30T06:52:25Z

遺伝学研究

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	=== 遺伝学研究 ===		=== 遺伝学研究 ===

	他のモデル生物に比べ遺伝学研究が遅れているが、[[遺伝子導入]]（[[トランスジェニック]]）は[[wikipedia:ja:精子\|精子]][[wikipedia:ja:核移植\|核移植]]を用いた[[REMI法]]（restriction enzyme-mediated integration）<ref name=ref10 />などにより多数の系統が作出されている。神経系への直接の影響を観察する神経科学においては遺伝子導入に[[~~電気窄孔（electroporation）法~~]]~~が用いられ、~~[[神経発生期]]での特定遺伝子の[[過剰発現]]による脳の形態異常や遺伝子発現変化などの解析で効果を挙げている。また、[[微小電極]]を用いて単一[[ニューロン]]あるいは[[グリア細胞]]へ遺伝子導入する方法も確立されている<ref name=ref11><pubmed>12147134</pubmed></ref>。遺伝子ばかりでなくタンパク質や[[蛍光デキストラン]]など標識化合物など電荷をもった分子を導入できことから高分解能での解析が可能となっている。		他のモデル生物に比べ遺伝学研究が遅れているが、[[遺伝子導入]]（[[トランスジェニック]]）は[[wikipedia:ja:精子\|精子]][[wikipedia:ja:核移植\|核移植]]を用いた[[REMI法]]（restriction enzyme-mediated integration）<ref name=ref10 />などにより多数の系統が作出されている。神経系への直接の影響を観察する神経科学においては遺伝子導入に[[電気窄孔法]]（electroporation）が用いられ、[[神経発生期]]での特定遺伝子の[[過剰発現]]による脳の形態異常や遺伝子発現変化などの解析で効果を挙げている。また、[[微小電極]]を用いて単一[[ニューロン]]あるいは[[グリア細胞]]へ遺伝子導入する方法も確立されている<ref name=ref11><pubmed>12147134</pubmed></ref>。遺伝子ばかりでなくタンパク質や[[蛍光デキストラン]]など標識化合物など電荷をもった分子を導入できことから高分解能での解析が可能となっている。

	機能阻害実験に関しては現時点で[[遺伝子破壊]]が不可能であり、[[アンチセンスモルフォリノオリゴヌクレオチド]]（MO）がいわゆる[[ノックダウン]]実験に用いられる。4倍体であるため遺伝子によってはノックダウン効率を高めるために、倍化によって生じた相同な遺伝子（ホメオログ）に対する2種類のMOを用いる必要があるが、MOによるノックダウン実験は一般的な方法となっている<ref name=ref12><pubmed>11477685</pubmed></ref> <ref name=ref13><pubmed>22222519</pubmed></ref>。とくに神経科学においては、16もしくは32細胞期の背側および動物極側割球に選択的にmRNAを注入することにより初期発生への影響を排除して中枢神経系への影響を観察できることはアフリカツメガエルの有利性のひとつである。		機能阻害実験に関しては現時点で[[遺伝子破壊]]が不可能であり、[[アンチセンスモルフォリノオリゴヌクレオチド]]（MO）がいわゆる[[ノックダウン]]実験に用いられる。4倍体であるため遺伝子によってはノックダウン効率を高めるために、倍化によって生じた相同な遺伝子（ホメオログ）に対する2種類のMOを用いる必要があるが、MOによるノックダウン実験は一般的な方法となっている<ref name=ref12><pubmed>11477685</pubmed></ref> <ref name=ref13><pubmed>22222519</pubmed></ref>。とくに神経科学においては、16もしくは32細胞期の背側および動物極側割球に選択的にmRNAを注入することにより初期発生への影響を排除して中枢神経系への影響を観察できることはアフリカツメガエルの有利性のひとつである。

	== 参考文献 ==		== 参考文献 ==