104
回編集
細編集の要約なし |
細編集の要約なし |
||
7行目: | 7行目: | ||
[[ファイル:FRET図1.jpg|thumb|right|300px|'''図1:ヤブロンスキーダイヤグラム''']] | [[ファイル:FRET図1.jpg|thumb|right|300px|'''図1:ヤブロンスキーダイヤグラム''']] | ||
[[ファイル:FRET図3.jpg|thumb|right|300px|'''図2:励起光によって励起された光子が基底状態に戻る際の減衰曲線''']] | [[ファイル:FRET図3.jpg|thumb|right|300px|'''図2:励起光によって励起された光子が基底状態に戻る際の減衰曲線''']] | ||
[[ファイル:FRET図2.jpg|thumb|right|300px|'''図3: | [[ファイル:FRET図2.jpg|thumb|right|300px|'''図3:Donorの蛍光スペクトルとAcceptorの励起スペクトルに重なりがあるときに、FRETが起きる。例としてAcceptorをGFP、DonorをRFPで表している。''']] | ||
== 原理 == | == 原理 == | ||
38行目: | 38行目: | ||
近年、時間相関単一光子計数法とpulsing laserの相性の良さから、時間分解能の向上により、蛍光寿命を比較的短時間で取得することが可能となった。 蛍光寿命は、GFPおよびそのcolor variantタンパクでは、1-5 nsec、希土類錯体などは、1µsec、pyren coronenなどは、400, 200 nsecである。上述のように、FRETが起きると蛍光寿命を表す減衰曲線の傾きが変わる。これを基にFRETを観察する。 | 近年、時間相関単一光子計数法とpulsing laserの相性の良さから、時間分解能の向上により、蛍光寿命を比較的短時間で取得することが可能となった。 蛍光寿命は、GFPおよびそのcolor variantタンパクでは、1-5 nsec、希土類錯体などは、1µsec、pyren coronenなどは、400, 200 nsecである。上述のように、FRETが起きると蛍光寿命を表す減衰曲線の傾きが変わる。これを基にFRETを観察する。 | ||
=== | === Anisotropyを測定する方法 === | ||
一つの蛍光団のストークスシフトが小さい場合、励起スペクトルと蛍光スペクトルの重なりが大きい。このような蛍光団では、同一の蛍光団同士で、Homo-FRETが生じる。Homo-FRETは、蛍光強度および蛍光寿命は変化しないが、異方性が変わる。この原理を用いて、一般的には、分子同士のクラスターの度合いなどに応用されている。 | 一つの蛍光団のストークスシフトが小さい場合、励起スペクトルと蛍光スペクトルの重なりが大きい。このような蛍光団では、同一の蛍光団同士で、Homo-FRETが生じる。Homo-FRETは、蛍光強度および蛍光寿命は変化しないが、異方性が変わる。この原理を用いて、一般的には、分子同士のクラスターの度合いなどに応用されている。 | ||
回編集