「FM1-43」の版間の差分

[[Image:Takahashinoriko fig 3.jpg|thumb|300px|'''図3''']]

　細胞外を FM1-43 で還流中に、短い放出刺激を与え（例 20 Hz、30 発）、開口放出([[エクソサイトーシス]]）した小胞の膜を染める。  

　[[シナプス小胞]]は 30-60秒で細胞内部に[[エンドサイトーシス]]で取り込まれる(図 3左）。その後、細胞外を、色素を含まない溶液で還流し、細胞外膜に結合した色素を wash out する。このような loading 過程を経て示される蛍光量は、30回の刺激時に開口放出した小胞にあたり Readily releasable pool （RRP）のサイズの指標となる。カエル [[神経筋接合部]]の場合、RRP の小胞数は神経終末内小胞の約 15％（12-17％）と報告された<ref><pubmed>　15044806 </pubmed></ref>。

　次に、細胞外色素フリーの状態で放出刺激を与えると、前段階で染められたシナプス小胞は細胞膜と融合し、細胞外液への拡散により神経終末の蛍光は減弱する（destaining 図 3右）。この減弱の程度や時間経過から、開口放出の量と速度が評価できる。蛍光減弱の時間経過は single exponential に近似されることから、放出確率 (Release probability, Pr) は蛍光減弱の時定数に反比例すると考えられる。Prの計算法として、（Recycling pool の小胞数×0.63）/ (37％に蛍光減弱するまでに与えた電気パルス数）で示す方法<ref><pubmed> 18701072 </pubmed></ref> が提起された。より簡易的には、FM1-43 の蛍光半減期の逆数<ref><pubmed> 11426227 </pubmed></ref>で示されるケースもある。