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→核酸の抽出
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<font size="+1">[http://researchmap.jp/takahirochihara/?lang=japanese 千原 崇裕]、[http://researchmap.jp/masayukimiura | <font size="+1">[http://researchmap.jp/takahirochihara/?lang=japanese 千原 崇裕]、[http://researchmap.jp/masayukimiura 三浦 正幸]</font><br> | ||
''東京大学大学院薬学系研究科 遺伝学教室''<br> | ''東京大学大学院薬学系研究科 遺伝学教室''<br> | ||
DOI：<selfdoi /> | DOI：<selfdoi /> 原稿受付日：2015年5月7日 原稿完成日：2015年6月16日<br> | ||
担当編集委員：[http://researchmap.jp/read0080380 上口 裕之]（国立研究法人理化学研究所脳科学総合研究センター）<br> | 担当編集委員：[http://researchmap.jp/read0080380 上口 裕之]（国立研究法人理化学研究所脳科学総合研究センター）<br> | ||
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英語名：northern blot, northern blotting | 英語名：northern blot, northern blotting | ||
{{box|text= ノザンブロットとは、分子生物学研究においてRNAの量やサイズを検出する手法である。}} | |||
[[image:ノザンブロット1.png|thumb|350px|'''図1．ノザンブロット法によるRNA検出の概略図''']] | [[image:ノザンブロット1.png|thumb|350px|'''図1．ノザンブロット法によるRNA検出の概略図''']] | ||
== ノザンブロットとは == | == ノザンブロットとは == | ||
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==手順== | ==手順== | ||
=== 核酸の抽出 === | === 核酸の抽出 === | ||
ノザンブロットを行うには、まず細胞、組織から[[wj:リボ核酸|total RNA]]を抽出する必要がある。[[wj:oligo (dT)カラム|oligo (dT)カラム]]等を用いてtotal RNAの中からpoly(A)tailを持った[[ | ノザンブロットを行うには、まず細胞、組織から[[wj:リボ核酸|total RNA]]を抽出する必要がある。[[wj:oligo (dT)カラム|oligo (dT)カラム]]等を用いてtotal RNAの中からpoly(A)tailを持った[[mRNA]]を精製してもよい<ref><pubmed> 8245974 </pubmed></ref><ref><pubmed> 1709098 </pubmed></ref>。 | ||
=== 電気泳動 === | === 電気泳動 === | ||
抽出したRNAは、[[wj:アガロースゲル電気泳動|アガロースゲル]]を用いた電気泳動でRNAサイズ依存的に分離する。 | 抽出したRNAは、[[wj:アガロースゲル電気泳動|アガロースゲル]]を用いた電気泳動でRNAサイズ依存的に分離する。 | ||