グリア細胞株由来神経栄養因子

英語名：glial cell line derived neurotrophic factor　英語略称名：GDNF

歴史 　GDNFはパーキンソン病患者におけるドーパミンニューロンの細胞死を防ぐ因子を探索する過程で、ラットのグリア系細胞株B49から分泌される、ドーパミンニューロンの生存や形態的分化、ドーパミンアップテイクを促進するタンパク質として同定された。構造的にはTGF-βスーパーファミリーに属する。その後、様々なニューロンに対して栄養因子として働くことや、ヒルシュスプルング症候群（Hirschsprung's disease）の原因遺伝子の一つであることなど、多様な機能とそれに対応した様々な病態との関連が指摘されている。

シグナル伝達

　細胞膜にGPIアンカーで結合している受容体GDNF family receptor（GFR）α-1が、主なGDNF受容体である。GFRαには４種類が知られており、GDNFは GFRα-2にも結合活性があるようで、基本的にはneurturin等のリガンドと各受容体が１対１で対応しているが、ある程度の交差性がある。GDNFのホモ２量体が結合したGFRα-1はさらに膜貫通型チロシンキナーゼのRETタンパク質と相互作用して、これを活性化する（GFRα-1とRETが先にヘテロ４量体を形成しており、そこにGDNFが結合するという説もある）。活性化されたRETは、受容体チロシンキナーゼに一般的に見られるように、自己リン酸化とそれに続く様々なタンパク質の結合を経てphosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-Akt経路やmitogen-activated protein kinase (MAPK)経路など複数のシグナル伝達経路を活性化する。RET単独では細胞死誘導活性があることから、これらのシグナル伝達経路の活性化がGDNFによるニューロンの生存活性をになっているものと考えられる。一方、RETを介さないGDNF-GFRαシグナルの存在も示唆されている。この場合、Srcファミリーキナーゼやphospholipase Cγの活性化を経て、c-fos遺伝子の転写の活性化やRETを発現していないニューロンの生存を促進するという。

神経発生における機能と活性 （１）細胞死の抑制 　GDNFがもともと培養された中脳腹側のドーパミンニューロンにたいする栄養因子活性物質として同定されたことからもわかるように、GDNF-GFRα-1シグナルは様々なニューロンに対して細胞死を抑制する効果がある。しかし、必ずしもin vitroで栄養因子活性が確認されたニューロンが、GDNF-GFRα-1シグナルやRETのノックアウトマウスで死んでしまうわけではなく、例えば中脳腹側のドーパミンニューロンの生存に異常はみられない。これは、他の栄養因子による代償効果であると考えられ、ドーパミンニューロンの場合にはconserved dopamine neurotrophic factor（CDNF）などの関与が示唆されている。一方、後根神経節（dorsal root ganglion）の一部の侵害受容性感覚ニューロン（nociceptive sensory neuron）や迷走神経節神経節（nodose ganglion）の内蔵感覚ニューロン（visceral sensory neuron）の生存はGDNF-GFRα-1-RETシグナルに依存しており、とりわけ侵害受容性感覚ニューロンは胎生期の神経成長因子（nerve growth factor）依存から出生後にGDNF依存にシフトする事が知られている。感覚ニューロンだけでなく、運動ニューロンの減少も報告されている。GDNFのノックアウトマウスでは三叉神経で20％、脊髄レベルで20〜30％程度の減少が認められる。 　GDNFシグナルは分化したニューロンについてのみ、栄養因子として機能するわけではない。RET遺伝子はヒトのヒルシュスプルング症候群の原因遺伝子として知られており、消化管のうち胃より後方において、腸管神経系（enteric nervous system）が欠損する。すなわち、腸管神経系は後脳レベルから消化管に侵入してくる神経堤細胞（vagal neural crest）がニューロンやグリアに分化しながら分布を広げ、形成されていくのだが、この神経堤細胞の増殖と生存にGDNF-GFRα-1-RETシグナルが重要である。 （２）GDNFシグナルのさまざまな機能 　GDNF-GFRα1シグナルは、細胞の生存だけでなく移動のガイダンス分子としても働くと考えられている。生後の大脳側脳室から生まれたニューロン前駆細胞はrostral migratory stream（RSM）という移動経路を通って嗅球に分布するが、この移動にはNCAMが重要であることが知られている。このニューロン前駆細胞にはRETは発現していないが、GFRα-1が発現している。GFRα-1ノックアウトマウスではRSMが若干太くなっていることから、細胞移動に異常があるものと考えられている。GDNFはGFRα-1と結合した後、NCAMと相互作用して、NCAM同士のホモフィリックな結合を阻害するとともに、細胞質に局在するチロシンキナーゼであるFynやFocal adhesion kinase（FAK）を活性化することから、RET非依存的なGDNF-GFRα-1-NCAMシグナルがRMSにおけるニューロン前駆細胞の移動を促進していると思われる。同様のシグナルは培養下で海馬や大脳皮質ニューロンの神経突起伸長促進やプレシナプスの成熟とシナプス形成、シュワン細胞の移動などの機能を担っている。また、RETやNCAMにも依存しないGFRα-1活性として、大脳皮質のGABAergicニューロンの接線方向への移動の制御が報告されている。 （３）GDNF- GFRα-1によるシナプス形成の制御 　GFRα-1はリガンドであるGDNF依存性の細胞接着因子としても働くことが示されている。一方、GDNF- GFRα-1シグナルが中脳ドーパミンニューロンや神経筋終末での神経伝達物質分泌の促進や、プレシナプス顆粒のサイズと数の増加、アセチルコリン受容体のクラスター形成の促進などの効果を持つことも示されている。また、GDNFシナプスに対する影響はRETに依存せず、NCAMに部分的に依存するケースが報告されている。これらのことから、GDNF- GFRα-1が接着因子としてシナプスの形成や維持、活性の制御に関わっているのではないかと考えられている。このような考えに対応して、GDNFの変異体マウスでは学習能力に問題があり、GDNFヘテロ変異マウスの海馬において一時的なプレシナプスタンパク質の集積異常が認められる。

薬物依存、ドーパミン仮説とGDNF 　薬物依存には通常時のドーパミンレベルの低下が関係していると言われており（ドーパミン仮説）、アルコールや様々な薬物が側坐核（nucleus accumbens）におけるドーパミンレベルの低下をおこすことが報告されている。前述したGDNFのドーパミンニューロンに対する効果に加え、のアルコール依存症の患者の血中GDNF量が減少していることや、GDNFのヘテロノックアウトマウスではアルコールの報酬効果が上昇していることなどから、GDNFが薬物依存症治療に有効なのではないかと考えられている。Barakらはアルコール依存状態のラットについて調べ、側坐核におけるドーパミン量の減少を確認するとともに、ドーパミン産生ニューロンの細胞体がある腹側被蓋野（ventral tegmental area）へのGDNF注入が側坐核のドーパミン量を回復させ、アルコール依存状態の改善をもたらすことを示した。