「高速液体クロマトグラフィー」の版間の差分
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==高速液体クロマトグラフィー== | ==高速液体クロマトグラフィー== | ||
(イントロを御願い出来ればと思います。) | |||
==原理== | ==原理== | ||
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====ポンプ==== | ====ポンプ==== | ||
移動相の制御に欠かせない装置である。メーカーによって多少異なる形をしているが基本的な構造は同じである。1台のポンプで1つの移動相が基本であるが、2つの電磁弁が付属していると2つの移動相を制御することができる(図1-B)。高速アミノ酸分析計(HITACHI)では電磁弁が5つ付属しており、1台のポンプで5種類の移動相を切り替えて1分析で約40種類のアミノ酸を定量することができる。電磁弁以外では、リザーバ−切り替えバルブがあり同様に6種類の移動相を変えることが可能である。 | |||
====インジェクター==== | ====インジェクター==== | ||
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====アイソクラティック法とグラジエント法==== | ====アイソクラティック法とグラジエント法==== | ||
目的物質を移動相の溶媒の性質を変えて分離条件良く分析する方法には、アイソクラティック(Isocratic)法とグラジエント(Gradient)法がある。アイソクラティック法では単一な移動相を用いシンプルな装置で分析する。移動相の組成は複雑で、緩衝溶液のほかに有機溶媒やイオンペア試薬の添加をすることが多い。一方のグラジエント法は、2種類以上の移動相を用いるためHPLCシステムが少々複雑になる。一般的には移動相として水系の[[wikipedia:JA:緩衝溶液|緩衝溶液]]と[[wikipedia:JA:有機溶媒|有機溶媒]]の2つを用い、徐々に濃度勾配をつけて分離を行う。この方法で良い分離が得られない場合は、移動相の濃度をステップワイズに変えたり、これと直線的に変える方法を組み合わせるとよい。 | |||
====イオンペア試薬==== | ====イオンペア試薬==== |