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「子宮内手術法」の版間の差分
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子宮内手術は、子宮内のラット胎仔の足や尾などを切断後、胎仔の生存を調べた実験に遡る<ref name="ref2">'''E Bors'''<br>Die Methodik der Intrauterinen Operation am Überlebenden Säugetierfoetus. ''Arch Entwichl-Mech Org.''<br>:1925, 105;655-666</ref><ref name="ref3">'''J S Nicholas'''<br>Notes on the application of experimental methods upon mammalian embryos. ''Anatomical Records''<br>:1925, 31;385-396</ref>。手技や発生生物学の進歩とともに、マウス胎仔へ血球系細胞 <ref name="ref4"><pubmed>42904</pubmed></ref>や神経冠細胞<ref name="ref5"><pubmed>4058595</pubmed></ref>を移植し、出生後のマウスを解析することにより、移植に用いた細胞がどのような細胞に分化できるか（分化能）を調べる実験が行われた。その後、マウス脳の細胞などをラット胎仔の脳に移植する実験も行われ、神経系細胞の個性を生体内で解析できるようになった<ref name="ref6"><pubmed>7720584</pubmed></ref><ref name="ref7"><pubmed>8845151</pubmed></ref><ref name="ref8"><pubmed>8845152</pubmed></ref>。 <br> | 子宮内手術は、子宮内のラット胎仔の足や尾などを切断後、胎仔の生存を調べた実験に遡る<ref name="ref2">'''E Bors'''<br>Die Methodik der Intrauterinen Operation am Überlebenden Säugetierfoetus. ''Arch Entwichl-Mech Org.''<br>:1925, 105;655-666</ref><ref name="ref3">'''J S Nicholas'''<br>Notes on the application of experimental methods upon mammalian embryos. ''Anatomical Records''<br>:1925, 31;385-396</ref>。手技や発生生物学の進歩とともに、マウス胎仔へ血球系細胞 <ref name="ref4"><pubmed>42904</pubmed></ref>や神経冠細胞<ref name="ref5"><pubmed>4058595</pubmed></ref>を移植し、出生後のマウスを解析することにより、移植に用いた細胞がどのような細胞に分化できるか（分化能）を調べる実験が行われた。その後、マウス脳の細胞などをラット胎仔の脳に移植する実験も行われ、神経系細胞の個性を生体内で解析できるようになった<ref name="ref6"><pubmed>7720584</pubmed></ref><ref name="ref7"><pubmed>8845151</pubmed></ref><ref name="ref8"><pubmed>8845152</pubmed></ref>。 <br> | ||
一方、1980年にマウス胎仔へレトロウイルスを感染させる実験が行われ<ref name="ref9"><pubmed>7357600</pubmed></ref>、遺伝子組換え技術により大腸菌のβ−ガラクトシダーゼの遺伝子を持つ組換えウイルスが作られるようになると、β−ガラクトシダーゼをレポーターとして感染した細胞の標識が可能となった<ref name="ref10"><pubmed>3102226</pubmed></ref> | 一方、1980年にマウス胎仔へレトロウイルスを感染させる実験が行われ<ref name="ref9"><pubmed>7357600</pubmed></ref>、遺伝子組換え技術により大腸菌のβ−ガラクトシダーゼの遺伝子を持つ組換えウイルスが作られるようになると、β−ガラクトシダーゼをレポーターとして感染した細胞の標識が可能となった<ref name="ref10"><pubmed>3102226</pubmed></ref>。レトロウイルスのcDNAは感染細胞のゲノムに組み込まれ感染細胞の子孫の細胞でもレポーターを発現し続けるため、細胞分裂毎に希釈される蛍光色素の欠点が克服され、細胞系譜の解析は容易となった<ref name="ref11"><pubmed>3137660</pubmed></ref>。さらに、ウイルスベクターの改良が進み緑色蛍光タンパク質（GFP）がレポーターとして使われ始めると、GFPを持つ組換えウイルスやトランスジェニック動物を用い、研究が一段と進むこととなった。 <br> | ||
しかし、組換えウイルスやトランスジェニック動物の作製にはかなりの時間を要する点が大きな問題であったが、子宮内の胎仔に電気穿孔法で遺伝子導入する生体内電気穿孔法が開発され<ref name="ref1"><pubmed>11784059</pubmed></ref><ref name="ref12"><pubmed>17406448</pubmed></ref>、胎仔を用いた遺伝子の解析が飛躍的に進展している。 | しかし、組換えウイルスやトランスジェニック動物の作製にはかなりの時間を要する点が大きな問題であったが、子宮内の胎仔に電気穿孔法で遺伝子導入する生体内電気穿孔法が開発され<ref name="ref1"><pubmed>11784059</pubmed></ref><ref name="ref12"><pubmed>17406448</pubmed></ref>、胎仔を用いた遺伝子の解析が飛躍的に進展している。 | ||
== | == 手法 == | ||
細胞の増殖能や分化能と遺伝子の機能などを哺乳類が発生する過程で解析することを目的とし、妊娠動物を開腹し子宮内の胎仔に細胞移植や遺伝子導入、薬剤の注入などを行う。図は、マウス胎仔の脳室へ溶液を注入する様子を示す<ref name="ref1"><pubmed>13461864</pubmed></ref> | 細胞の増殖能や分化能と遺伝子の機能などを哺乳類が発生する過程で解析することを目的とし、妊娠動物を開腹し子宮内の胎仔に細胞移植や遺伝子導入、薬剤の注入などを行う。図は、マウス胎仔の脳室へ溶液を注入する様子を示す<ref name="ref1"><pubmed>13461864</pubmed></ref>。適切な処置が施されれば、胎仔は子宮とともに母体に戻すことで生育でき、出産も可能である。<br> | ||
マウスの場合、子宮壁を切開した状態でも卵黄囊の中で胎仔は生存できるため、子宮壁を切開後に細胞移植などを行い、子宮壁を縫合せずに母体に戻す手術も行われ、子宮外手術法（exo utero surgery）と呼ばれる<ref name="ref13"><pubmed>20691868</pubmed></ref>。子宮外手術を行っても、胎仔は正常に生育できるが、母マウスは自力で出産できないため、生後のマウスを必要な場合は出産期に帝王切開が必要となる。 <br> | マウスの場合、子宮壁を切開した状態でも卵黄囊の中で胎仔は生存できるため、子宮壁を切開後に細胞移植などを行い、子宮壁を縫合せずに母体に戻す手術も行われ、子宮外手術法（exo utero surgery）と呼ばれる<ref name="ref13"><pubmed>20691868</pubmed></ref>。子宮外手術を行っても、胎仔は正常に生育できるが、母マウスは自力で出産できないため、生後のマウスを必要な場合は出産期に帝王切開が必要となる。 <br> | ||
神経細胞の多くは胎生期に作られるため、生体内における神経細胞の分化の解析などには、子宮内手術や子宮外手術は威力を発揮する。 <br> | 神経細胞の多くは胎生期に作られるため、生体内における神経細胞の分化の解析などには、子宮内手術や子宮外手術は威力を発揮する。 <br> | ||