「Förster共鳴エネルギー移動」の版間の差分

蛍光共鳴エネルギー移動(FRET) 英：fluorescence resonance energy transfer　英略称：FRET、独：仏： FRETは、1946年、Theodor Försterによって初めて報告された現象である。Donor となる蛍光体の蛍光スペクトルとAcceptorとなる蛍光体の励起スペクトルに重なりがあるときに、DonorからAcceptorへのエネルギー移動が起きる。GFPおよびバイオイメージングの発展によって、FRETを基にした細胞内シグナル伝達分子の可視化検出などに用いられ、神経分野においても、個体の脳のにおいて応用されている。 目次 １． 原理 ２．検出 蛍光強度比 蛍光寿命 ２． 細胞生物学および神経科学への応用 cAMP, カルシウムイメージング, リン酸化 スパインイメージング Actin, CaMkII, Ras ３． 将来展望 In vivo イメージング 超高解像度イメージング マルチカラーイメージング ４． 参考文献  

<br> １）ドナーとアクセプターの蛍光強度を測定する方法。 FRETが起きると、Donorの蛍光強度が減少し、Acceptorの蛍光強度が減少する。測定の際には、蛍光強度の変化を測定することになるが、細胞などの試料においては、細胞の形状変化に伴う蛍光強度変化などが起きることから、実際には、ドナーとアクセプターの蛍光強度のの変化を取得することによって、これらのファクターを除外する。  

２）ドナーの蛍光寿命を測定する方法。 近年、時間相関単一光子計数法とpulsing laserの相性の良さから、時間分解能の向上により、蛍光寿命を比較的短時間で取得することが可能となった。 蛍光寿命は、GFPおよびそのcolor variantタンパクでは、1-5 nsec、希土類錯体などは、1µsec、pyren coronenなどは、400, 200 nsecである。上述のように、FRETが起きると蛍光寿命を表す減衰曲線の傾きが変わる。これを基にFRETを観察する。