「FM1-43」の版間の差分

FM色素は脂質二重膜を可逆的に染める蛍光色素で、シナプス前機能や分泌現象の計測に活用されている。  

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  1. FM1-43 とは <br>

               ・分泌小胞の直径測定      <br>

FM（Fei Mao）は細胞膜を染めるスチリル色素を合成した。FM1-43 はその代表格である。<br>

シナプス前終末の機能解析や、分泌小胞の動態解析に広く用いられる。<br>

構造は、親水性領域、二重結合領域、疎水性炭素鎖領域に分けられる。<br>

親水性領域が正の電荷をもつため、膜を通過しない。二重結合の数は蛍光波長に関連する。<br>

FM1-43 の炭素鎖数は 4であり、解離時定数 τdiss は 8msを示す。より短い FM2-10(炭素鎖数 2)は、比較的離脱しやすい(τdiss =6.4 ms)。逆に、より長い FM1-84（炭素鎖数 5）は離脱に時間がかかる(τdiss =36 ms)<ref><pubmed> 19580748 </pubmed></ref>。

   

FM1-43 の励起には 1光子では波長 480 nm光、2光子では波長 840 nm 光が頻用される。<br>

極大蛍光波長はリポゾーム中にて 580 nm である。<br>

波長 480 nm光の高出力励起（～150 μW）にてジアミノベンゼン（DAB）の光変換（photoconversion） を起こす。そのため、アルデヒドで固定可能な色素：FM1-43FX と DAB を細胞に与え、光変換させると、共局在部位で電子密度の高い産物が作られ、電子顕微鏡観察が可能となる。FM1-43 を取り込んだ小胞が、高い電子密度で描出され、微細構造解析に利用されている。 <br>

細胞外を FM1-43 で還流中に、短い放出刺激を与え（例 20 Hz、30 発）、開口放出した小胞の膜を染める。 <br>