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'''==要約==''' <br> | '''==要約==''' <br>FM 色素は脂質二重膜を可逆的に染める蛍光色素で、シナプス前機能や分泌現象の計測に活用されている。 | ||
'''==目次== <br>'''<br> | '''==目次== <br>'''<br> | ||
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'''<br>==FM1-43 とは== <br>'''FM（Fei Mao）は細胞膜を染めるスチリル色素を合成した。FM1-43 はその代表格である。<br>シナプス前終末の機能解析や、分泌小胞の動態解析に広く用いられる。<br> | '''<br>==FM1-43 とは== <br>'''FM（Fei Mao）は細胞膜を染めるスチリル色素を合成した。FM1-43 はその代表格である。<br>シナプス前終末の機能解析や、分泌小胞の動態解析に広く用いられる。<br>色素の特性として次の 3つの性質がある。<br> ①水溶液中に存在する場合に比べ、細胞膜に結合すると量子効率が著増し、強い蛍光を出す。<br> ②脂質二重膜を透過しない。<br> ③両親媒性で可逆的に膜を染める。 [[Image:Takahashinoriko fig 1.jpg|thumb|center|224x220px|図1]]<br> | ||
<br>'''==分子構造==<br>'''構造は、親水性領域、二重結合領域、疎水性炭素鎖領域に分けられる。<br>親水性領域が正の電荷をもつため、膜を通過しない。二重結合の数は蛍光波長に関連する。<br>二重結合が一つの FM1-43・FM1-84・FM2-10 は黄色蛍光を呈し、二重結合が二つの FM4-64・FM5-95 は赤色蛍光を呈する。<br>疎水性炭素鎖の長さは細胞膜の染め方に関連し、長いものほど明るく、一旦膜に組み込まれると離脱しがたい<ref><pubmed> 10202529 </pubmed></ref>。 FM1-43 の炭素鎖数は 4であり、解離時定数 τdiss は | <br>'''==分子構造==<br>'''構造は、親水性領域、二重結合領域、疎水性炭素鎖領域に分けられる。<br>親水性領域が正の電荷をもつため、膜を通過しない。二重結合の数は蛍光波長に関連する。<br>二重結合が一つの FM1-43・FM1-84・FM2-10 は黄色蛍光を呈し、二重結合が二つの FM4-64・FM5-95 は赤色蛍光を呈する。<br>疎水性炭素鎖の長さは細胞膜の染め方に関連し、長いものほど明るく、一旦膜に組み込まれると離脱しがたい<ref><pubmed> 10202529 </pubmed></ref>。 FM1-43 の炭素鎖数は 4であり、解離時定数 τdiss は 8 msを示す。より短い FM2-10(炭素鎖数 2)は、比較的離脱しやすい(τdiss =6.4 ms)。逆に、より長い FM1-84（炭素鎖数 5）は離脱に時間がかかる(τdiss =36 ms)<ref><pubmed> 19580748 </pubmed></ref>。 [[Image:Takahashinoriko fig 2.jpg|thumb|center|400px|図2]] | ||
''' ==蛍光特性==<br>'''FM1-43 の励起には 1光子では波長 480 nm光、2光子では波長 840 nm 光が頻用される。<br>極大蛍光波長はリポゾーム中にて 580 nm である。<br>波長 480 nm光の高出力励起（～150 μW）にてジアミノベンゼン（DAB）の光変換（photoconversion） を起こす。そのため、アルデヒドで固定可能な色素：FM1-43FX と DAB を細胞に与え、光変換させると、共局在部位で電子密度の高い産物が作られ、電子顕微鏡観察が可能となる。FM1-43 を取り込んだ小胞が、高い電子密度で描出され、微細構造解析に利用されている。 <br> | ''' ==蛍光特性==<br>'''FM1-43 の励起には 1光子では波長 480 nm光、2光子では波長 840 nm 光が頻用される。<br>極大蛍光波長はリポゾーム中にて 580 nm である。<br>波長 480 nm光の高出力励起（～150 μW）にてジアミノベンゼン（DAB）の光変換（photoconversion） を起こす。そのため、アルデヒドで固定可能な色素：FM1-43FX と DAB を細胞に与え、光変換させると、共局在部位で電子密度の高い産物が作られ、電子顕微鏡観察が可能となる。FM1-43 を取り込んだ小胞が、高い電子密度で描出され、微細構造解析に利用されている。 <br> | ||