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Yoshikatsuaikawa (トーク | 投稿記録) 細編集の要約なし |
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同義語: tetanus neurotoxin、tetanospasmin | 同義語: tetanus neurotoxin、tetanospasmin | ||
テタヌス毒素とは、土壌中に棲息する[[wikipedia:ja:グラム陽性型|グラム陽性型]]の[[嫌気性細菌]]である[[wikipedia:ja:クロストリジウム属|クロストリジウム属]]の''Clostridium tetani''([[wikipedia:ja:破傷風菌|破傷風菌]])により産出される世界最強のタンパク質毒素の1つである。 同属には''Clostridium botulinum''([[wikipedia:ja:ボツリヌス菌|ボツリヌス菌]])が産出する[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]があり、これらは共に分子量約50 kDaの軽鎖と100 | テタヌス毒素とは、土壌中に棲息する[[wikipedia:ja:グラム陽性型|グラム陽性型]]の[[嫌気性細菌]]である[[wikipedia:ja:クロストリジウム属|クロストリジウム属]]の''Clostridium tetani''([[wikipedia:ja:破傷風菌|破傷風菌]])により産出される世界最強のタンパク質毒素の1つである。 同属には''Clostridium botulinum''([[wikipedia:ja:ボツリヌス菌|ボツリヌス菌]])が産出する[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]があり、これらは共に分子量約50 kDaの軽鎖と100 kDaの重鎖の2本のポリペプチド鎖から構成される。テタヌス毒素の生体への毒素の作用機序としては、まず重鎖が神経細胞の膜にある[[wikipedia:ja:ガングリオシド|ガングリオシド]]に結合し、続いてテタヌス毒素分子の細胞内への侵入を起こす。侵入後、亜鉛依存的なタンパク質分解活性をもつ軽鎖が、[[wikipedia:ja:神経伝達物質|神経伝達物質]]の[[wikipedia:ja:エキソサイトーシス|エキソサイトーシス]]を担う[[wikipedia:SNARE|SNARE]]タンパク質のVAMPを分解することにより[[wikipedia:ja:神経伝達物質|神経伝達物質]]の放出が抑制することにより、テタヌス([[wikipedia:tetanus|tetanus]])と呼ばれる痙攣性[[wikipedia:ja:麻痺|麻痺]]が引き起こされる。 | ||
== テタヌス毒素とは == | == テタヌス毒素とは == | ||
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== テタヌス毒素の構造 == | == テタヌス毒素の構造 == | ||
テタヌス毒素の[[wikipedia:ja:遺伝子|遺伝子]]は、''Clostridium tetani ''([[wikipedia:ja:破傷風菌|破傷風菌]])において75 kbの[[wikipedia:ja:プラスミド|プラスミド]]上にコードされ、分子量150 kDaの単純タンパク質を合成する。<ref><pubmed> 3536478 </pubmed></ref>。合成された1本のポリペプチド鎖(1315アミノ酸)は不活性であるが、[[wikipedia:ja:トリプシン|トリプシン]]様のタンパク質分解酵素により457番目のAlaから461番目のAspまでの間で限定分解を受け、N末端側の分子量50 kDaの軽鎖(449アミノ酸)とC末端側の分子量100 kDaの重鎖(857アミノ酸)となり活性型となる。両鎖は、1つの[[wikipedia:ja:ジスルフィド結合|ジスルフィド結合]]と非共有結合により繋がっている。翻訳後の分解が正しく行われた場合にのみ培養液中に放出される。<br> テタヌス毒素の構造名称については、破傷風菌と同属である([[wikipedia:ja:ボツリヌス菌|ボツリヌス菌]])が産出する[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]で提唱された名称と、第8回国際破傷風会議(1987)で採択された名称とがある。前者の場合、軽鎖を(L)、重鎖を(H)とする。また重鎖(H)は、そのN末端側の50 kDaのαヘリックスドメインを(H<sub>N</sub>)、そのC末端側(865-1315)にある50 kDaを(H<sub>C</sub>)とし、さらにH<sub>C</sub>には分子量25 kDaのH<sub>C</sub>NとH<sub>C</sub>Cのサブドメインに分けられる。一方後者の場合、テタヌス毒素を[[wikipedia:ja:パパイン|パパイン]]処理するとC末端側50 kDaのペプチド断片とN末端側100 kDaのペプチド断片に分離されたことから、重鎖のC末端側50 kDaをFragment C(Frg C)、N末端側50 kDaをFragment B (Frg B)、さらに軽鎖をFragment A (Frg A) と呼称している。テタヌス毒素と各血清型の[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]との遺伝子レベルでの比較では、全体の相同性は~35%と低い。各ドメインにはそれぞれ異なる機能があり、N末端側のLドメインは金属タンパク質分解活性をもち、H<sub>N</sub>ドメインは膜移行に、そしてH<sub>C</sub>ドメインは結合に、それぞれ関与している (図1)。 [[Image:図1.jpg|center|400px]] | |||
== 軽鎖(L)立体構造と機能 == | == 軽鎖(L)立体構造と機能 == | ||
他の[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]の軽鎖(L)と同様に、テタヌス毒素の軽鎖(L)は、亜鉛依存的な金属タンパク質分解酵素として作用し毒性を引き起こす。テタヌス毒素の軽鎖(L)は、[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]Bと同様にシナプス小胞の膜蛋白質のv-SNAREであるSynaptobrevin-2/vesicle-associated membrane protein (VAMP)のGln(76)とPhe(77)の間の限定分解を行う(図2)。その結果、シナプス小胞とシナプス前膜とのドッキングが阻害され、抑制性神経伝達物質であるGABAやGlycineなどの放出が抑制される。これがテタヌス毒素によるシナプス前抑制の分子機構である。<ref><pubmed> 1331807 </pubmed></ref>。ただし、図3に示すようにSynaptobrevin-2/vesicle-associated membrane protein (VAMP)のアイソフォームの中には、テタヌス毒素に切断されないものもある。<ref><pubmed> 10865130 </pubmed></ref>。テタヌス毒素の軽鎖(L)の触媒ドメインの二量体構造とその活性部位を示す。テタヌス毒素の軽鎖(L)の活性部位は、基質となるタンパク質が近づきやすい溝の内部に位置し、亜鉛に結合するモチーフであるHExxH(233-237) | 他の[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]の軽鎖(L)と同様に、テタヌス毒素の軽鎖(L)は、亜鉛依存的な金属タンパク質分解酵素として作用し毒性を引き起こす。テタヌス毒素の軽鎖(L)は、[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]Bと同様にシナプス小胞の膜蛋白質のv-SNAREであるSynaptobrevin-2/vesicle-associated membrane protein (VAMP)のGln(76)とPhe(77)の間の限定分解を行う(図2)。その結果、シナプス小胞とシナプス前膜とのドッキングが阻害され、抑制性神経伝達物質であるGABAやGlycineなどの放出が抑制される。これがテタヌス毒素によるシナプス前抑制の分子機構である。<ref><pubmed> 1331807 </pubmed></ref>。ただし、図3に示すようにSynaptobrevin-2/vesicle-associated membrane protein (VAMP)のアイソフォームの中には、テタヌス毒素に切断されないものもある。<ref><pubmed> 10865130 </pubmed></ref>。テタヌス毒素の軽鎖(L)の触媒ドメインの二量体構造とその活性部位を示す。テタヌス毒素の軽鎖(L)の活性部位は、基質となるタンパク質が近づきやすい溝の内部に位置し、亜鉛に結合するモチーフであるHExxH(233-237)が中央部となるように正に荷電した亜鉛と[[wikipedia:ja:配位結合|配位結合]]する。つまり、亜鉛は2つのHisのイミダゾ-ル環(His(232)とHis(236))、そしてGlu(270)などのアミノ酸、さらにGlu(233)と強固な水素結合を形成する求核性の水分子、といった4つと相互作用している。特にこのモチーフ内にあるグルタミン酸は、それに結合している水分子が直接的にタンパク質の加水分解反応に関与するため特に重要である。<ref><pubmed> 15895988 </pubmed></ref>。<ref><pubmed> 15904688 </pubmed></ref>。[[Image:図2.jpg|left|400px]] [[Image:図3.jpg|center|400px]] | ||
== 重鎖(H)構造と機能 == | == 重鎖(H)構造と機能 == | ||
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== テタヌス毒素の作用機序 == | == テタヌス毒素の作用機序 == | ||
テタヌス毒素は神経筋接合部から神経終末膜を介して神経内に取り込まれる。テタヌス毒素は[[逆行性輸送]]され、脊髄前角に到達し、細胞膜を通過しシナプス前膜を通りさらに上位の中枢へと運搬される。そこで抑制性[[wikipedia:ja:シナプス|シナプス]]を遮断し、痙性麻痺を引き起こす。ついで興奮性[[wikipedia:ja:シナプス|シナプス]]も遮断し、筋は拘縮した状態となる。ちなみにこれは筋の弛緩を発生させる[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]の作用と逆となる。テタヌス毒素は、神経細胞に対して、(1) 毒素の結合、(2) 毒素のエンドサイトーシス、(3) 膜からの細胞質への移行、(4) 標的タンパク質であるVAMPの分解、といった4段階を介して作用する(図4)。<ref><pubmed> 13678859 </pubmed></ref>。現在もなおテタヌス毒素の受容体については不明であるが、テタヌス毒素のHcCドメインには、2つのガングリオシド結合部位がこれまでに同定され、ポリシアロ[[wikipedia:ja:ガングリオシド|ガングリオシド]]分子と糖タンパク質にそれぞれ結合することが考えられている。実際にテタヌス毒素はGPI-アンカー型糖タンパク質と[[wikipedia:ja:脂質ラフト|脂質ラフト]]に結合する。図3に示したように、運動神経終末での形質膜上に発現する受容体を介した[[wikipedia:ja:エンドサイトーシス|エンドサイトーシス]]により取り込まれる[[wikipedia:ja:ボツリヌストキシン|ボツリヌストキシン]]とは異なり、テタヌス毒素は[[wikipedia:ja:脂質ラフト|脂質ラフト]]や[[wikipedia:ja:ガングリオシド|ガングリオシド]]であるGD1bを含む脂質タンパク質受容体複合体に結合する[[wikipedia:ja:クラスリン|クラスリン]]依存的なエンドサイトーシスにより内部に入る。[[wikipedia:ja:クラスリン|クラスリン]]被覆小胞によりいったん取り込まれたテタヌス毒素は、神経中枢の神経細胞体へ逆行性に運ばれ、さらに[[wikipedia:ja:シナプス|シナプス]]を越えて高次神経細胞の[[wikipedia:ja:シナプス|シナプス]]前部に到達する過程(Transcytosis)にHcが関与している。標識されたHcは取り込まれた後も中性を保ったコンパートメントで細胞体へと逆行性に運搬され、運動神経の[[wikipedia:ja:樹状突起|樹状突起]]に集積される。BDNFやGDNFなどの[[wikipedia:ja:神経栄養因子|神経栄養因子]]と比較すると、運搬速度や[[wikipedia:ja:樹状突起|樹状突起]]への集積速度は同じ(1 μm/sec)であるが、[[wikipedia:ja:シナプス|シナプス]を越えて次の[[wikipedia:ja:シナプス|シナプス]]前部への移行はHcの方がほぼ倍の速度で行われることが明らかにされた。[[Image:図4.jpg|center|300px]] | |||
== 関連項目 == | == 関連項目 == |
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