「ゴルジ染色」の版間の差分

{{box|text=　ゴルジ染色は、クロム酸とオスミウム酸で 固定した脳サンプルを、硝酸銀に沈めて神経細胞の微細構造を可視化する染色方法。ごくわずかの神経細胞がランダムに染⾊され、染まった細胞は⿊く、そのほかの細胞は無⾊であるため、鍍銀された神経細胞が明瞭に浮かび上がる。このため、本法による染⾊像は他の染⾊方法と⽐べて⾼いコントラストを有する。一方、煩雑でかつ成功までには技術を要する。}}

== ゴルジ染⾊法の原理 ==

　ゴルジ染⾊とゴルジ・コックス染⾊は⽤いる化合物が異なっており、ゴルジ染⾊ではシンプルにオスミウム酸と[[wj:⼆クロム酸カリウム|⼆クロム酸カリウム]]で固定した脳を硝酸銀⽔溶液に漬けるのみであるが、ゴルジ・コックス染⾊では、⼆クロム酸に加えて[[wj:クロム酸カリウム|クロム酸カリウム]]と[[wj:塩化⽔銀|塩化水銀]]で固定した脳を[[wj:アンモニア|アンモニア]]⽔で発⾊（⿊化）させている（7, 8）<ref name=NautaW1970>'''Eds: Nauta Walle JH; Ebbesson Sven OE'''<br>Contemporary Research Methods in Neuroanatomy<br>''Springer'': 1970</ref><ref name=HW2017>'''Kang HW et al.'''<br>Comprehensive Review of Golgi Staining Methods for Nervous Tissue<br>''Kang Appl Microsc.,'' 47, 63-69: 2017</ref>。すなわちゴルジ染⾊ではクロム酸銀の沈着を、またゴルジ・コックス染⾊では、⽔銀とアンモニア⽔による反応で⾦属⽔銀の沈着を観察することとなる。（9）（アリゾナ州立大学　James P. Birkのウェブサイト[http://www.public.asu.edu/~jpbirk/qual/qualanal/mercury.html Mercury]を参照。

== ゴルジ染⾊の⽅法 ==

=== ゴルジ染色（原法） ===

# 2.3% (w/w) ⼆クロム酸カリウムならびに0.19% (w/w)[[wj:酸化オスミウム(VIII)|四酸化オスミウム]]を含んだ固定液を作成し、約4-5 mm ⾓の脳標品を20 mL の固定液に浸漬する。室温で７⽇間保存する。

# リンスをせずに脳標品を1 の溶液に戻し６⽇間再固定する。

# 新しい硝酸銀⽔溶液を⽤いて２の操作を繰り返し２晩保存する。

# 新しい1 の固定液再び沈め３⽇間保存する。

# 100%エタノールで湿らせながらスライド式ミクロトームで100-300 μm 程度に薄切する。薄切した切⽚は100%エタノールの⼊った容器に15 分間沈め、その後、クローブ油か[[wj:テレビン油|テレピン油]]の⼊った容器に移して15 分間沈める。

# 作成した5％⼆クロム酸カリウム⽔溶液と5％塩化⽔銀⽔溶液を混合し（合計200 ml）、ガラス棒を⽤いて撹拌する。3. 2 で混合した溶液と5％クロム酸カリウム⽔溶液を混合し、さらに蒸留⽔を200 ml を加える。溶液の⼊ったボトルは遮光し２⽇から１週間程度暗所室温で保存してから使⽤する。