初代培養

提供:脳科学辞典
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英:Primary culture

初代培養は、組織を生体外で培養する技術のうちの一つであり、特に組織をタンパク質分解酵素などで処理して、ばらばらにした細胞を培養皿中で培養することを示す。神経組織を構成する神経細胞、アストロサイト、オリゴデンドロサイト、シュワン細胞、また、ミクログリアなど神経系細胞のほとんどが初代培養で培養することが可能である。一般的に、継代を経ない培養のことを初代培養と呼ぶことが多いが、グリア細胞の培養系は継代を経る場合もあり、広義な初代培養に含められる。グリア細胞の場合でも、何世代も継代が可能な株化培養細胞とは異なって継代回数が限られている場合が多い。初代培養された細胞は、株化培養細胞と比べて生体内に近い状態を維持していると考えられるため、様々な解析に広く用いられている。


== 初代培養の歴史 ==

19世紀中頃に、Wilhelm Hisは神経系の軸索がどのように形成されるのかについて、軸索は発生期に細胞体からの突起として出現するという仮説を提唱した。これは、分裂した細胞が鎖状につながることによって軸索を形成するという説とともに論議をよんだ。Hisの仮説は、後年のCajalらの組織学的解析によって支持されていたが、より直接的に証明する必要があった。そのため、アメリカのHarrisonらは伸び続ける神経の末端を’生きたまま’観察するための方法を考案した。それは、カエル胚から採取した神経管をカエルのリンパ液中で培養する方法であり、神経軸索が細胞体から伸びる現象を経時的に観察することが可能であり、軸索が細胞質からでた突起であることを直接的に証明した。このことが、いわゆる組織培養(広義の初代培養)の始めであるとされている。後年、ダルベッコらによって開発されたトリプシンを用いて組織をばらばらとし、単一細胞として培養する方法、また、培地や添加剤の改良などを経て、現在の神経系初代培養技術が確立した。