「電気穿孔法」の版間の差分
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培養皿や生体組織などから単離した細胞の懸濁液を核酸とともに[[wikipedia:ja:キュベット|キュベット]]に入れ、浮遊状態で電気パルスを与える。通常、高電圧で単一の減衰波パルスを用い、[[wikipedia:Bio-Rad|Bio-Rad社]]のジーンパルサーなどの装置が使われる。過去の多くのデータがあり、業者のプロトコールに従い、遺伝子導入を容易に行えるのが利点である。高い導入効率を得ようとすると、細胞の生存率が下がる点が欠点となる。 | 培養皿や生体組織などから単離した細胞の懸濁液を核酸とともに[[wikipedia:ja:キュベット|キュベット]]に入れ、浮遊状態で電気パルスを与える。通常、高電圧で単一の減衰波パルスを用い、[[wikipedia:Bio-Rad|Bio-Rad社]]のジーンパルサーなどの装置が使われる。過去の多くのデータがあり、業者のプロトコールに従い、遺伝子導入を容易に行えるのが利点である。高い導入効率を得ようとすると、細胞の生存率が下がる点が欠点となる。 | ||
動物細胞は500 | 動物細胞は500 microF, 240 Vなど、大腸菌では25 microF, 2000 Vなどの条件が用いられる。 | ||
最も単純なパルス作製装置は、[[wikipedia:ja:コンデンサー|コンデンサー]]に蓄電した電気をスィッチの切替でキュベット内に放出させる仕組みであり<ref name="ref10"><pubmed>21963197</pubmed></ref>、初期には研究室で自作された。 | 最も単純なパルス作製装置は、[[wikipedia:ja:コンデンサー|コンデンサー]]に蓄電した電気をスィッチの切替でキュベット内に放出させる仕組みであり<ref name="ref10"><pubmed>21963197</pubmed></ref>、初期には研究室で自作された。 | ||