「子宮内手術法」の版間の差分

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英:in utero surgery
英:''in utero'' surgery 独:intrauterinen Operation


[[Image:図−子宮内手術法.jpg|thumb|right|250px|<b>図.子宮内手術の1例</b><br />妊娠マウスを開腹し子宮内の胎仔の脳室へマイクロピペットで溶液を注入<span class=]]&lt;pubmed&gt;11784059&lt;/pubmed&gt;。本図では、溶液を可視化するため色素を用いている。" class="fck_mw_frame fck_mw_right" /&gt;
[[Image:図−子宮内手術法.jpg|thumb|right|250px|<b>図.子宮内手術の1例</b><br />妊娠マウスを開腹し子宮内の胎仔の脳室へマイクロピペットで溶液を注入<pubmed><ref>11784059</pubmed></ref>。本図では、溶液を可視化するため色素を用いている。]]


 子宮内手術法とは、[[wikipedia:ja:哺乳類|哺乳類]]の[[wikipedia:ja:発生|発生]]機構などを解析することを目的として[[wikipedia:ja:子宮|子宮]]内の胎仔に施す[[wikipedia:ja:外科|外科]]的手法である。手術後の胎仔を子宮内で生育させることが可能であるため、胎仔に移植した細胞や導入した[[wikipedia:ja:遺伝子|遺伝子]]の機能を長期間にわたり個体レベルで解析できるのが特長である。  
 子宮内手術法とは、[[wikipedia:ja:哺乳類|哺乳類]]の[[wikipedia:ja:発生|発生]]機構などを解析することを目的として[[wikipedia:ja:子宮|子宮]]内の胎仔に施す[[wikipedia:ja:外科|外科]]的手法である。手術後の胎仔を子宮内で生育させることが可能であるため、胎仔に移植した細胞や導入した[[wikipedia:ja:遺伝子|遺伝子]]の機能を長期間にわたり個体レベルで解析できるのが特長である。  
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 子宮内手術は、子宮内のラット胎仔の足や尾などを切断後、胎仔の生存を調べた実験に遡る<ref name="ref2">'''E Bors'''<br>Die Methodik der Intrauterinen Operation am Überlebenden Säugetierfoetus. ''Arch Entwichl-Mech Org.''<br>: 1925, 105;655-666</ref><ref name="ref3">'''J S Nicholas'''<br>Notes on the application of experimental methods upon mammalian embryos. ''Anatomical Records''<br>: 1925, 31;385-396</ref>。手技や発生生物学の進歩とともに、マウス胎仔へ[[wikipedia:ja:血球|血球]]系細胞 <ref name="ref4"><pubmed>42904</pubmed></ref>や[[神経冠]]細胞<ref name="ref5"><pubmed>4058595</pubmed></ref>を移植し、出生後のマウスを解析することにより、移植に用いた細胞がどのような細胞に[[分化]]できるか(分化能)を調べる実験が行われた。その後、マウス脳の細胞などをラット胎仔の脳に移植する実験も行われ、神経系細胞の個性を生体内で解析できるようになった<ref name="ref6"><pubmed>7720584</pubmed></ref><ref name="ref7"><pubmed>8845151</pubmed></ref><ref name="ref8"><pubmed>8845152</pubmed></ref>。  
 子宮内手術は、子宮内のラット胎仔の足や尾などを切断後、胎仔の生存を調べた実験に遡る<ref name="ref2">'''E Bors'''<br>Die Methodik der Intrauterinen Operation am Überlebenden Säugetierfoetus. ''Arch Entwichl-Mech Org.''<br>: 1925, 105;655-666</ref><ref name="ref3">'''J S Nicholas'''<br>Notes on the application of experimental methods upon mammalian embryos. ''Anatomical Records''<br>: 1925, 31;385-396</ref>。手技や発生生物学の進歩とともに、マウス胎仔へ[[wikipedia:ja:血球|血球]]系細胞 <ref name="ref4"><pubmed>42904</pubmed></ref>や[[神経冠]]細胞<ref name="ref5"><pubmed>4058595</pubmed></ref>を移植し、出生後のマウスを解析することにより、移植に用いた細胞がどのような細胞に[[分化]]できるか(分化能)を調べる実験が行われた。その後、マウス脳の細胞などをラット胎仔の脳に移植する実験も行われ、神経系細胞の個性を生体内で解析できるようになった<ref name="ref6"><pubmed>7720584</pubmed></ref><ref name="ref7"><pubmed>8845151</pubmed></ref><ref name="ref8"><pubmed>8845152</pubmed></ref>。  


 一方、1980年にマウス胎仔へ[[wikipedia:ja:レトロウイルス|レトロウイルス]]を感染させる実験が行われ<ref name="ref9"><pubmed>7357600</pubmed></ref>、[[wikipedia:ja:遺伝子組換え|遺伝子組換え]]技術により[[wikipedia:ja:大腸菌|大腸菌]]の[[wikipedia:ja:β−ガラクトシダーゼ|β−ガラクトシダーゼ]]の遺伝子を持つ組換えレトロウイルスが作られるようになると、β−ガラクトシダーゼをレポーターとして感染した細胞の標識が可能となった<ref name="ref10"><pubmed>3102226</pubmed></ref>。レトロウイルスのcDNAは感染細胞のゲノムに組み込まれ感染細胞の子孫の細胞でもレポーターを発現し続けるため、細胞分裂毎に希釈される[[wikipedia:ja:蛍光色素|蛍光色素]]の欠点が克服され、[[wikipedia:ja:細胞系譜|細胞系譜]]の解析は容易となった<ref name="ref11"><pubmed>3137660</pubmed></ref>。さらに、[[ウイルスベクター]]の改良が進むとともに[[緑色蛍光タンパク質]](GFP)がレポーターとして使われ始めると、''GFP''を持つ組換えウイルスや[[トランスジェニック動物]]を用い、研究が一段と進むこととなった。  
 一方、1980年にマウス胎仔へ[[wikipedia:ja:レトロウイルス|レトロウイルス]]を感染させる実験が行われ<ref name="ref9"><pubmed>7357600</pubmed></ref>、[[wikipedia:ja:遺伝子組換え|遺伝子組換え]]技術により[[wikipedia:ja:大腸菌|大腸菌]]の[[wikipedia:ja:β−ガラクトシダーゼ|β−ガラクトシダーゼ]]の遺伝子を持つ組換えレトロウイルスが作られるようになると、β−ガラクトシダーゼをレポーターとして感染した細胞の標識が可能となった<ref name="ref10"><pubmed>3102226</pubmed></ref>。レトロウイルスのcDNAは感染細胞のゲノムに組み込まれ感染細胞の子孫の細胞でもレポーターを発現し続けるため、[[細胞分裂]]毎に希釈される[[wikipedia:ja:蛍光色素|蛍光色素]]の欠点が克服され、[[wikipedia:ja:細胞系譜|細胞系譜]]の解析は容易となった<ref name="ref11"><pubmed>3137660</pubmed></ref>。さらに、[[ウイルスベクター]]の改良が進むとともに[[緑色蛍光タンパク質]](GFP)がレポーターとして使われ始めると、''GFP''を持つ組換えウイルスや[[トランスジェニック動物]]を用い、研究が一段と進むこととなった。  


 しかし、組換えウイルスやトランスジェニック動物の作製にはかなりの時間を要する点が大きな問題であったが、子宮内の胎仔に[[電気穿孔法]]で遺伝子導入する生体内電気穿孔法が開発され<ref name="ref1"><pubmed>11784059</pubmed></ref><ref name="ref12"><pubmed>17406448</pubmed></ref>、胎仔を用いた遺伝子の解析が飛躍的に進展している。    
 しかし、組換えウイルスやトランスジェニック動物の作製にはかなりの時間を要する点が大きな問題であったが、子宮内の胎仔に[[電気穿孔法]]で遺伝子導入する生体内電気穿孔法が開発され<ref name="ref1"><pubmed>11784059</pubmed></ref><ref name="ref12"><pubmed>17406448</pubmed></ref>、胎仔を用いた遺伝子の解析が飛躍的に進展している。    
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<references />  
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<br> (執筆者:斎藤哲一郎 担当編集委員:大隅典子)
(執筆者:斎藤哲一郎 担当編集委員:大隅典子)

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