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==遺伝子導入による発現量の増加== | ==遺伝子導入による発現量の増加== | ||
動物個体あるいは細胞に外来遺伝子を導入することで任意の遺伝子発現量を増加させることができる。外来遺伝子を導入した動物個体はトランスジェニック動物と呼ばれ現在ではあらゆる動物種で作製が可能となっている。 | |||
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====リン酸カルシウム法==== | ====リン酸カルシウム法==== | ||
導入する遺伝子 (DNA)とリン酸カルシウムを混和することで形成された不溶性複合体を細胞表面に吸着させ、細胞の食作用などを利用して細胞内に遺伝子を導入する方法。操作が簡便で特殊な装置を必要としない。 | |||
====リポフェクション法==== | ====リポフェクション法==== | ||
正に荷電している脂質からなる脂質二重膜小胞(リポソーム)と負に荷電している遺伝子は電気的に複合体を形成する。これらを負に荷電している細胞膜と融合、あるいは細胞の食作用などにより細胞に取り込まれる。リン酸カルシウム法と同様に特殊な装置を必要とぜず、また各社から試薬が市販されているため培養細胞では広く用いられている。 | |||
====エレクトロポレーション法==== | ====エレクトロポレーション法==== | ||
高電圧パルスを細胞に与えることで細胞膜構造に小孔をあけ、遺伝子を導入する方法。遺伝子導入効率は比較的高い反面、細胞生存率は低い。 | |||
====パーティクルガン法==== | ====パーティクルガン法==== | ||
金などの高比重かつ科学的に安定な金属粒子を導入したい遺伝子でコーティングしたものを高圧ガスで射出し細胞内に物理的に導入する方法。ジーンガンとも呼ばれる。 | |||
====ウイルスベクター法==== | ====ウイルスベクター法==== | ||
目的の遺伝子を組み込んだウイルスを細胞に感染させることで遺伝子を導入する方法。現在では主に、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクターの他、感染した細胞内で逆転写されて細胞ゲノムにに組み込まれるレトロウイルスベクター、レンチウイルスベクターなどが使用されている。 | |||
====マイクロインジェクション法==== | ====マイクロインジェクション法==== | ||
微細なガラス管をを介し細胞に直接遺伝子を導入する方法。個々の細胞に対して操作が必要であるため対象とする細胞数に制限が生じるが、導入効率が高いためトランスジェニック動物作製時においては本法で受精卵に遺伝子を導入するのが一般的である。 | |||
==機能の増強== | ==機能の増強== |
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