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ある遺伝子の機能を調べる際にその遺伝子の機能・発現量を増強させて得られた表現型から機能解析する実験手法。逆に遺伝子の機能や発現量を減弱させる実験は[[機能欠失実験]]と呼ばれる。 | ある遺伝子の機能を調べる際にその遺伝子の機能・発現量を増強させて得られた表現型から機能解析する実験手法。逆に遺伝子の機能や発現量を減弱させる実験は[[機能欠失実験]]と呼ばれる。 | ||
また、[[機能欠失実験]]によって得られた表現型を機能獲得実験により正常な表現型に回復させる実験を特にrescue実験と呼ぶ | また、[[機能欠失実験]]によって得られた表現型を機能獲得実験により正常な表現型に回復させる実験を特にrescue実験と呼ぶ | ||
==機能獲得実験の手法== | ==機能獲得実験の手法== | ||
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動物個体あるいは細胞に外来遺伝子を導入することで任意の遺伝子発現量を増加させることができる。外来遺伝子を導入した動物個体はトランスジェニック動物と呼ばれ現在ではあらゆる動物種で作製が可能となっている。 | 動物個体あるいは細胞に外来遺伝子を導入することで任意の遺伝子発現量を増加させることができる。外来遺伝子を導入した動物個体はトランスジェニック動物と呼ばれ現在ではあらゆる動物種で作製が可能となっている。 | ||
===導入する遺伝子=== | ===導入する遺伝子=== | ||
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==機能の増強== | ==機能の増強== | ||
=== アミノ酸置換による疑似リン酸化=== | |||
目的のタンパク質が持つアミノ酸がリン酸化されることでその機能が増強する場合、そのアミノ酸をGlu, またはAspに置換した変異体を発現することで恒常的なリン酸化状態を擬似的に再現できる場合がある。これはリン酸化アミノ酸が水溶液中では負電荷をもつが、Glu, Aspなどの酸性アミノ酸も負電荷をもつためである。例えば、MAP kinase kinase (MKK)はSer218およびSer222は上流のRaf1/MAP KKKによりリン酸化されることで活性化するが、これらのSer残基をGluに置換したMAPKK変異体は恒常的に活性化する<ref><pubmed> 7936666 </pubmed></ref>。 | |||
局在の変化 | ===局在の変化=== | ||
AKT | AKT | ||
<references/> | <references/> |
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