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「血液脳関門」の版間の差分
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[[Image:Tachikawa table 1.jpg|thumb|300px|表1．'''血液脳関門（Blood-brain barrier, BBB）輸送機能研究の実験手法''']] | [[Image:Tachikawa table 1.jpg|thumb|300px|表1．'''血液脳関門（Blood-brain barrier, BBB）輸送機能研究の実験手法''']] | ||
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| style="text-align:center" | 実験手法 | | style="text-align:center" | 実験手法 | ||
| style="text-align:center" | 応用事例 | | style="text-align:center" | 応用事例 | ||
| style="text-align:center" | 解析内容 | | style="text-align:center" | 解析内容 | ||
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| colspan="3" | ''In vivo'' BBB輸送解析法 | | colspan="3" | ''In vivo'' BBB輸送解析法 | ||
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| 静脈内投与法<br> | | 静脈内投与法<br>（Integration plot法） | ||
| げっ歯類 | | げっ歯類 | ||
| 循環血液から脳方向のinflux輸送速度を解析 | | 循環血液から脳方向のinflux輸送速度を解析 | ||
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| 脳灌流法<br> | | 脳灌流法<br>（In ''situ'' brain perfusion法）<ref name="ref100"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| げっ歯類 | | げっ歯類 | ||
| 血液から脳方向のinflux輸送速度を解析 | | 血液から脳方向のinflux輸送速度を解析 | ||
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| Brain Uptake Index(BUI)法<ref name=ref101><pubmed></pubmed></ref> | | Brain Uptake Index(BUI)法<ref name="ref101"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| げっ歯類 | | げっ歯類 | ||
| 循環血液から脳方向のinflux輸送速度を解析 | | 循環血液から脳方向のinflux輸送速度を解析 | ||
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| Brain Efflux Index(BEI)法<ref name=ref102><pubmed></pubmed></ref> | | Brain Efflux Index(BEI)法<ref name="ref102"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| げっ歯類 | | げっ歯類 | ||
| 脳から循環血液方向のefflux輸送速度を解析 | | 脳から循環血液方向のefflux輸送速度を解析 | ||
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| 脳微小透析法<br> | | 脳微小透析法<br>（Brain microdialysis法）<ref name="ref103"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| げっ歯類<br>霊長類にも応用可能 | | げっ歯類<br>霊長類にも応用可能 | ||
| 循環血液から脳方向/脳から循環血液方向のinflux及びefflux輸送速度を解析、脳細胞間隙中のタンパク非結合形濃度の算出が可能 | | 循環血液から脳方向/脳から循環血液方向のinflux及びefflux輸送速度を解析、脳細胞間隙中のタンパク非結合形濃度の算出が可能 | ||
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| 定量オートラジオグラフィー | | 定量オートラジオグラフィー | ||
| げっ歯類 | | げっ歯類 | ||
| 脳部位ごとの物質分布の定量化が可能 | | 脳部位ごとの物質分布の定量化が可能 | ||
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| Magnetic resonance imaging (MRI) | | Magnetic resonance imaging (MRI) | ||
| げっ歯類<br>霊長類、ヒト | | げっ歯類<br>霊長類、ヒト | ||
| ヒト''in vivo'' BBB輸送解析が可能 | | ヒト''in vivo'' BBB輸送解析が可能 | ||
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| Positoron emission tomography (PET) | | Positoron emission tomography (PET) | ||
| げっ歯類<br>霊長類、ヒト | | げっ歯類<br>霊長類、ヒト | ||
| 循環血液から脳方向のinflux輸送速度を解析<br>ヒト''in vivo'' BBB輸送解析が可能 | | 循環血液から脳方向のinflux輸送速度を解析<br>ヒト''in vivo'' BBB輸送解析が可能 | ||
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| colspan="3" | ''In vitro'' BBB輸送解析法 | | colspan="3" | ''In vitro'' BBB輸送解析法 | ||
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| | | 単離脳毛細血管<br>（Capillary depletion法）<ref name="ref104"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類<br>霊長類、ヒト | ||
| | | 脳組織から簡便に毛細血管画分を単離できる<br>輸送実験や発現解析に利用可能 | ||
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| | | Magnetic cell sorting<br> (MACS)<ref name="ref105"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類 | ||
| | | 単離脳血管から、高純度脳毛細血管内皮細胞を単離できる、収率は低いが、RT-PCRによるmRNAレベルでの発現解析可能 | ||
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| | | 初代培養細胞<ref name="ref106"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類 | ||
| | | 脳毛細血管内皮細胞の単離培養が可能 | ||
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| | | 条件的不死化細胞<ref name="ref107"><pubmed></pubmed></ref> <ref name="ref108"><pubmed></pubmed></ref> <ref name="ref109"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類、ヒト | ||
| | | 細胞ロット間の差を最小限にでき、輸送特性の詳細な解析が可能 | ||
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| | | 多能性幹細胞からの分化誘導細胞<ref name="ref111"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | ヒト | ||
| | | アストロサイトとの共培養によって、強固な密着結合が形成可能であり、経細胞輸送解析に有用 | ||
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| | | トランスポーター強制発現系<ref name="ref110"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類、ヒト | ||
| | | ヒト遺伝子発現系を用いて、ヒトトランスポーターの機能解析ができる。標的定量プロテオミクスで、トランスポーターの発現量を計測することによって、単分子あたりの輸送活性を算出。 | ||
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| | | colspan="3" | トランスポーター/受容体のBBB発現局在性解析 | ||
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| | | RT-PCR/イムノブロット | ||
| | | げっ歯類、ヒト | ||
| | | mRNAレベルの発現検出 | ||
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| | | ''In situ''ハイブリダイゼーション<ref name="ref112"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類<br>ヒト | ||
| | | mRNAレベルの発現検出、脳部位の判別可能 | ||
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| | | 免疫染色法、免疫電子顕微鏡法<ref name="ref112" /> | ||
| | | げっ歯類<br>ヒト | ||
| | | 抗体を用いて脳毛細血管における発現解析、脳毛細血管内皮細胞の脳側膜、血液側膜の判別が可能、特異性の高い抗体が必要 | ||
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| | | 標的絶対定量プロテオミクス<br>(Quantitative Targeted Absolute Proteomics, QTAP)<ref name="ref113"><pubmed></pubmed></ref> | ||
| | | げっ歯類<br>ヒト | ||
| | | 脳毛細血管に発現するタンパク質の絶対発現量を取得できる。抗体を用いずに、アミノ酸配列情報から定量系の確立が可能。''In vitro''輸送実験輸送解析系との組み合わせによって、''in vivo'' BBB輸送の予測が理論的に可能。 | ||
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<br> 表1に、BBB研究で用いられる実験手法をまとめた。BBBにおける輸送システムを解明する研究は、functional genomicsを背景に、多様な実験手法が開発されたことで飛躍的に進んだ。主な研究手法は、以下の様に大別される。詳細は、総説<ref>'''寺崎哲也,大槻純男,上家潤一'''<br>3. 薬効組織(脳、腫瘍)への輸送特性の評価 1) 血液脳関門の透過性の評価 7:170-177 遺伝子医学MOOK 最新創薬学2007, <br>''メディカル ドゥ'':2007</ref>を参照されたい。 | <br> 表1に、BBB研究で用いられる実験手法をまとめた。BBBにおける輸送システムを解明する研究は、functional genomicsを背景に、多様な実験手法が開発されたことで飛躍的に進んだ。主な研究手法は、以下の様に大別される。詳細は、総説<ref>'''寺崎哲也,大槻純男,上家潤一'''<br>3. 薬効組織(脳、腫瘍)への輸送特性の評価 1) 血液脳関門の透過性の評価 7:170-177 遺伝子医学MOOK 最新創薬学2007, <br>''メディカル ドゥ'':2007</ref>を参照されたい。 | ||