「超解像蛍光顕微鏡」の版間の差分

====<small>PALM,FPALM</small>====

蛍光一分子局在化法の一つとしてまず初めにPALM(photoactivated localization microscopy)<ref><pubmed> 16902090 </pubmed></ref>の原理について説明する。PALMでは蛍光色素として特定波長の刺激光照射により無蛍光(オフ)から蛍光状態(オン)へと変化するPA-GFPや蛍光色が緑色から赤色に変化するmEOSといった「光スイッチング蛍光タンパク質(Photo-Switchable Fluorescent Protein; PSFP)」を利用する。光スイッチングにより蛍光性が切り替わる確率は刺激光の強度と照射時間とおよそ比例関係があるので、それらを適切にコントロールすることで、PSFが重ならない程度にPSFPをオフからオンにスイッチングさせられる(図-①)。この状態であればFIONAを適用し蛍光一分子の位置解析を行う事ができる(図-②,③)。視野内のPSFPを退色させた後に同じ事をPSFPが全てなくなるまで何度も繰り返す。こうして発現させた蛍光分子全ての詳細な局在画像（PALM画像）を得る事ができる。図では比較のために②で得られた画像の総和も示した。これは通常の蛍光画像に相当する。通常の蛍光画像では観られなかった「P A L M」の4文字がPALM画像では確認できる。<br>

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蛍光一分子局在化法はPALM・FPALMの他にも様々な方法が開発されているが、大きく異なるのは図-①においてどのようにして蛍光分子の疎らなオンを達成するかであり、FIONAに相当する図-②,③の操作はどの方法もほぼ同様である。そこでその他の方法については蛍光分子のオン・オフの切り替えに焦点を絞り、以下で簡潔に説明する。<br>

====<small>STORM</small>====