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== ニューロンの初代培養 == | == ニューロンの初代培養 == | ||
[[Image:Hippocampal_primary_neuron.jpg|frame|right|280x205px|'''図1 海馬培養神経細胞'''<br> | [[Image:Hippocampal_primary_neuron.jpg|frame|right|280x205px|'''図1 海馬培養神経細胞'''<br>培養開始3日後。スケールバー、50 µm]] | ||
[[脊髄]][[後根神経節]]や、[[皮質]]および[[海馬]]由来のニューロンの培養が一般的に用いられている。[[wikipedia:JA:マウス|マウス]]、[[wikipedia:JA:ラット|ラット]]のみならず[[wikipedia:JA:ニワトリ|ニワトリ]]、[[wikipedia:JA:カエル|カエル]]など多様な生物のニューロンの初代培養系が確立されている。主に胎生期の動物の[[脳]]や脊髄を摘出し、顕微鏡下でおおまかに目的の部位を切り出す。これを細胞解離酵素(トリプシンなど)で処理し、細胞を解離する。この細胞をあらかじめ[[wikipedia:JA:ラミニン|ラミニン]]や[[wikipedia:Polylysine|ポリ-L-リシン]]などでコートした培養皿に播く。培養後一日程で、神経突起の伸長が観察される(図1)。また、およそ7日後には[[シナプス]]の形成が認められ、軸索伸長のメカニズムや[[樹状突起]]の形成、さらには電気生理学的な性質を解析することが可能である。海馬由来のニューロンの場合5ヶ月程度培養したという報告があるが<ref><pubmed> 8475109 </pubmed></ref>、[[運動ニューロン]]などは長期間の培養が困難である。 | [[脊髄]][[後根神経節]]や、[[皮質]]および[[海馬]]由来のニューロンの培養が一般的に用いられている。[[wikipedia:JA:マウス|マウス]]、[[wikipedia:JA:ラット|ラット]]のみならず[[wikipedia:JA:ニワトリ|ニワトリ]]、[[wikipedia:JA:カエル|カエル]]など多様な生物のニューロンの初代培養系が確立されている。主に胎生期の動物の[[脳]]や脊髄を摘出し、顕微鏡下でおおまかに目的の部位を切り出す。これを細胞解離酵素(トリプシンなど)で処理し、細胞を解離する。この細胞をあらかじめ[[wikipedia:JA:ラミニン|ラミニン]]や[[wikipedia:Polylysine|ポリ-L-リシン]]などでコートした培養皿に播く。培養後一日程で、神経突起の伸長が観察される(図1)。また、およそ7日後には[[シナプス]]の形成が認められ、軸索伸長のメカニズムや[[樹状突起]]の形成、さらには電気生理学的な性質を解析することが可能である。海馬由来のニューロンの場合5ヶ月程度培養したという報告があるが<ref><pubmed> 8475109 </pubmed></ref>、[[運動ニューロン]]などは長期間の培養が困難である。 | ||