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=== O-2A前駆細胞の単離方法 === | === O-2A前駆細胞の単離方法 === | ||
O-2A前駆細胞は、新生児ラットの視神経や[[大脳皮質]]をフラスコで2週間程度培養し、その後フラスコを激しく水平方面に激しく1晩振盪(200rpm以上)することにより浮遊してくる。Type 1アストロサイトやニューロンは、この条件では浮遊しない。この浮遊細胞を集め、ミクログリアを何もコートしていないプラスチックペトリ皿に付着させることで除いて[[継代培養]]すると、O-2A細胞が80~90%程度含まれるenriched cultureとなる。A2B5抗体を培養基質に塗布して、これに接着する細胞を集めることにより95%以上の純度でO-2A細胞を集めることができる<ref name=ref3>'''Bottenstein JE and Hunter SF''' <br>''Culture method for oligodendrocyte cell line and oligodendrocyte-type2 astrocyte lineage cells.''<br>In Cell culture, Conn PM ed, pp. 56-75, Methods in Neurosciences Vol. 2, Academic Press Inc., San Diego.(1990)</ref><ref name=ref4><pubmed>12379434</pubmed></ref>。培養条件により、アストログリア、またはオリゴデンドロサイトに分化させるようコントロールできることから、細胞分化調節機構解析のモデル細胞として扱われてきた。しかし、[[ | O-2A前駆細胞は、新生児ラットの視神経や[[大脳皮質]]をフラスコで2週間程度培養し、その後フラスコを激しく水平方面に激しく1晩振盪(200rpm以上)することにより浮遊してくる。Type 1アストロサイトやニューロンは、この条件では浮遊しない。この浮遊細胞を集め、ミクログリアを何もコートしていないプラスチックペトリ皿に付着させることで除いて[[継代培養]]すると、O-2A細胞が80~90%程度含まれるenriched cultureとなる。A2B5抗体を培養基質に塗布して、これに接着する細胞を集めることにより95%以上の純度でO-2A細胞を集めることができる<ref name=ref3>'''Bottenstein JE and Hunter SF''' <br>''Culture method for oligodendrocyte cell line and oligodendrocyte-type2 astrocyte lineage cells.''<br>In Cell culture, Conn PM ed, pp. 56-75, Methods in Neurosciences Vol. 2, Academic Press Inc., San Diego.(1990)</ref><ref name=ref4><pubmed>12379434</pubmed></ref>。培養条件により、アストログリア、またはオリゴデンドロサイトに分化させるようコントロールできることから、細胞分化調節機構解析のモデル細胞として扱われてきた。しかし、[[マウス]]胎仔および新生仔の脳の培養細胞では、同じような手順で行ってもO-2A細胞のenriched cultureは難しい。 | ||
=== オリゴデンドロサイト前駆細胞としてのO-2A前駆細胞 === | === オリゴデンドロサイト前駆細胞としてのO-2A前駆細胞 === | ||
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==== 転写因子 ==== | ==== 転写因子 ==== | ||
[[転写因子]]の[[Olig2]]は、[[Olig1]]とともに、[[ソニックヘッジホッグ]] | [[転写因子]]の[[Olig2]]は、[[Olig1]]とともに、[[ソニックヘッジホッグ]]([[Shh]])に誘導されるオリゴデンドロサイト系譜に特異的な転写因子として報告された<ref name=ref13><pubmed>10719888</pubmed></ref><ref name=ref14><pubmed>11091082</pubmed></ref><ref name=ref15><pubmed>10719889</pubmed></ref>。Olig2とOlig1はともにPDGFRαと同様に、[[脊髄]]腹側部から出現し次第に脊髄背側部に広がるが、発現そのものはオリゴデンドロサイト前駆細胞の出現以前からみられる。 | ||
[[Nkx2.2]]は、マウスではOlig2より腹側部で発現し、ニワトリ胚ではOlig2と一部重なり、O4陽性細胞で発現がみられる<ref name=ref16><pubmed>11526078</pubmed></ref>。またマウスでも発生の後期になるとOlig2とNkx2.2は同一の細胞で発現するようになる。Nkx2.2はミエリン[[プロテオリピドタンパク質]](PLP)の[[プロモーター]]に結合してその発現を調節する。 | [[Nkx2.2]]は、マウスではOlig2より腹側部で発現し、ニワトリ胚ではOlig2と一部重なり、O4陽性細胞で発現がみられる<ref name=ref16><pubmed>11526078</pubmed></ref>。またマウスでも発生の後期になるとOlig2とNkx2.2は同一の細胞で発現するようになる。Nkx2.2はミエリン[[プロテオリピドタンパク質]](PLP)の[[プロモーター]]に結合してその発現を調節する。 |