16,000
回編集
「緑色蛍光タンパク質（サンプル）」の版間の差分
ナビゲーションに移動
検索に移動
細
編集の要約なし
細 (→GFPの特性) |
細編集の要約なし |
||
| 1行目: | 1行目: | ||
英：green fluorescent protein、英略語：GFP、独：Grün fluoreszierendes Protein、仏：Protéine fluorescente verte | 英：green fluorescent protein、英略語：GFP、独：Grün fluoreszierendes Protein、仏：Protéine fluorescente verte <br> | ||
同義語：GFP、緑色蛍光タンパク質、緑色蛍光蛋白、緑色蛍光タンパク（よく使われる他の良い方などを書いて下さい．編集部でリンクを作ります） | 同義語：GFP、緑色蛍光タンパク質、緑色蛍光蛋白、緑色蛍光タンパク（よく使われる他の良い方などを書いて下さい．編集部でリンクを作ります） | ||
（冒頭に全体の要約を作成して下さい） | |||
緑色蛍光蛋白質とは、[[wikipedia:jp:%E3%82%AA%E3%83%AF%E3%83%B3%E3%82%AF%E3%83%A9%E3%82%B2|オワンクラゲ]]''Aequorea victoria'' | 緑色蛍光蛋白質とは、[[wikipedia:jp:%E3%82%AA%E3%83%AF%E3%83%B3%E3%82%AF%E3%83%A9%E3%82%B2|オワンクラゲ]]''Aequorea victoria''由来の緑色[[wikipedia:jp:%E8%9B%8D%E5%85%89|蛍光]]を発する[[wikipedia:jp:%E8%9B%8B%E7%99%BD%E8%B3%AA|蛋白質]]である。[[wikipedia:jp:%E4%B8%8B%E6%9D%91%E8%84%A9|下村脩]]により発光蛋白質である[[wikipedia:jp:%E3%82%A8%E3%82%AF%E3%82%AA%E3%83%AA%E3%83%B3|エクオリン]]の精製の過程で同定された<ref><pubmed> 13911999 </pubmed></ref>。GFPは異種の細胞でも容易に発現し、ほぼ毒性も無いのでGFPを発現するさまざまな[[wikipedia:jp:%E3%83%88%E3%83%A9%E3%83%B3%E3%82%B9%E3%82%B8%E3%82%A7%E3%83%8B%E3%83%83%E3%82%AF%E5%8B%95%E7%89%A9|トランスジェニック動物]]（[[wikipedia:jp:%E5%93%BA%E4%B9%B3%E9%A1%9E|哺乳類]]から[[wikipedia:jp:%E9%AD%9A%E9%A1%9E|魚類]]、[[wikipedia:jp:%E7%84%A1%E8%84%8A%E6%A4%8E%E5%8B%95%E7%89%A9|無脊椎動物]]）が開発されている。[[wikipedia:jp:%E9%81%BA%E4%BC%9D%E5%AD%90|遺伝子]]発現のレポーターや、その他の蛋白質と[[wikipedia:jp:%E8%9E%8D%E5%90%88%E8%9B%8B%E7%99%BD%E8%B3%AA|融合蛋白質]]を作成する事で、分子の局在を観察する事も可能である。また、[[Förster共鳴エネルギー移動]](FRET)などを応用し[[wikipedia:ja:センサー|センサー]]としての応用も可能で細胞内Ca<sup>2+</sup>、[[wikipedia:jp:%E3%82%B7%E3%82%B0%E3%83%8A%E3%83%AB%E4%BC%9D%E9%81%94|シグナル伝達]]、[[wikipedia:ja:%E9%85%B5%E7%B4%A0|酵素]]反応などの生体イメージングへの応用も試みられている<ref><pubmed> 16242400 </pubmed></ref>。 | ||
（以下の目次は見出しが有る場合、自動的に作成されます） | |||
== GFPとは== | == GFPとは== | ||
（見出しは==で囲んで下さい．） | （見出しは==で囲んで下さい．） | ||
==GFPとは== | |||
（はじめに解説用語について定義をしてください。） | |||
緑色蛍光蛋白質とは、オワンクラゲAequorea victoria由来の分子量約27,000の緑色の蛍光を発する蛋白質である。1960年代に下村脩により発光蛋白質であるエクオリンの精製の過程で同定された。エクオリンは生体内で緑色発光を示すが、精製標品は青色発光を示す。そのため、生体内ではエクオリンとGFPが複合体を作りエクオリンのエネルギーがGFPに移行する事により緑色の発光をすると考えられている。 | |||
（図は以下の様に入力します。） | |||
[[Image:GFP structure.png|thumb|'''図１ GFPの結晶構造'''<br>Tsienらによる。]] | [[Image:GFP structure.png|thumb|200px|'''図１ GFPの結晶構造'''<br>Tsienらによる。]] | ||
<nowiki>[[Image:GFP structure.png|thumb|'''図１ GFPの結晶構造'''<br>Tsienらによる。]]</nowiki> | <nowiki>[[Image:GFP structure.png|thumb|'''図１ GFPの結晶構造'''<br>Tsienらによる。]]</nowiki> | ||
（図の説明にも内部リンクを挿入することが出来ます。） | |||
[[Image:GFP-actin.png|thumb|200px|'''図２ GFP−[[アクチン]]融合タンパク質を発現した[[海馬]][[錐体細胞]]の[[二光子顕微鏡像]]'''<br>岡本らによる未発表データー。]] | [[Image:GFP-actin.png|thumb|200px|'''図２ GFP−[[アクチン]]融合タンパク質を発現した[[海馬]][[錐体細胞]]の[[二光子顕微鏡像]]'''<br>岡本らによる未発表データー。]] | ||
<nowiki>[[Image:GFP-actin.png|thumb|200px|'''図２ GFP−[[アクチン]]融合タンパク質を発現した[[海馬]][[錐体細胞]]の[[二光子顕微鏡像]]'''<br>岡本らによる未発表データー。]] </nowiki> | <nowiki>[[Image:GFP-actin.png|thumb|200px|'''図２ GFP−[[アクチン]]融合タンパク質を発現した[[海馬]][[錐体細胞]]の[[二光子顕微鏡像]]'''<br>岡本らによる未発表データー。]] </nowiki> | ||
| 42行目: | 43行目: | ||
===GFP色変異体=== | ===GFP色変異体=== | ||
セリン65をスレオニンに置き換えることでGFPの蛍光強度が向上するという発見を嚆矢とし、GFPに様々な変異を入れ、緑色ばかりではなく、青色から黄色までの変異体を作られている。 | |||
=== GFPを利用したセンサー蛋白質 === | === GFPを利用したセンサー蛋白質 === | ||
GFPを用い、様々な細胞内現象を蛍光を使って読み出すためのセンサーが開発されている。 | |||
一番始めに報告されたのは、細胞内カルシウム濃度を測定することができるCameleonであった。これは、カルシウム結合タンパク質の立体構造変化をシアン蛍光タンパク質と黄色蛍光タンパク質間のFRETを用い読み出すのものであった。 | |||
これをきっかけに、様々なセンサータンパク質がこれまで開発されている。 | |||
=== 他種動物由来GFP様蛋白質 === | === 他種動物由来GFP様蛋白質 === | ||
GFPの変異体でもっとも長波長の傾向を示す変異体でも黄色（ピーク波長525 nm付近）までであった。GFPとの二重染色のためには、赤色蛍光タンパク質が望ましかったが、GFPを変異体させることからは赤色蛍光タンパク質の作成は成功しなかった。 | |||
Lukyanovらのグループは様々な[[wikipedia:jp:%E8%85%94%E8%85%B8%E5%8B%95%E7%89%A9|腔腸動物]]を調べ、''Discoma sp.''由来のDsRedが、赤色蛍光を示す蛍光蛋白質である事を初めて報告した。元々は蛍光を示さないタンパク質であったが、変異を導入することにより赤色蛍光を持つようになった。当初報告されたDsRedは四量体であったが、変異をいれ単量体にしたmRFPやその波長の変異体が現在までに開発されている。mOrange, mCherry, mStrawberryなど、果物の名前が付けられた物が多く、mFruitsシリーズとしても知られる<ref><pubmed> 16614209 </pubmed></ref>。 | |||
==関連項目== | ==関連項目== | ||