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「Tet on/offシステム」の版間の差分
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同義語：Tetracycline-controlled transcriptional activation systems | 同義語：Tetracycline-controlled transcriptional activation systems | ||
Tet-on/ | Tet-on/offシステムとは[[wikipedia:JA:抗生物質|抗生物質]][[wikipedia:JA:テトラサイクリン|テトラサイクリン]][[wikipedia:JA:誘導体|誘導体]]である[[wikipedia:JA:ドキシサイクリン|ドキシサイクリン]]を投与することで細胞あるいは動物個体において可逆的に目的遺伝子の発現を調節できる実験系である。 このシステムは[[wikipedia:JA:大腸菌|大腸菌]][[wikipedia:JA:テトラサイクリン耐性オペロン|テトラサイクリン耐性オペロン]]で働くTetリプレッサー（TetR）とTetオペレーター配列(tetO配列)を利用し、TetRはテトラサイクリン非存在下でtetO配列に結合するが、テトラサイクリンが結合するとtetO配列に結合できなくなるという性質を利用している。 ドキシサイクリン存在下で目的遺伝子を発現するものをTet-Onシステム、逆にドキシサイクリン非存在下で目的遺伝子が発現し、ドキシサイクリン存在下では発現が抑制されるものをTet-Offシステムと呼ぶ<ref><pubmed> 1319065 </pubmed></ref>。 | ||
== 基本原理 == | == 基本原理 == | ||
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=== tTA: tetracycline transactivator === | === tTA: tetracycline transactivator === | ||
TetRと[[wikipedia:JA:ヘルペスウイルス|ヘルペスウイルス]]由来の[[wikipedia:JA:VP16|VP16]][[wikipedia:JA:転写活性|転写活性]]ドメイン (VP16AD)との融合タンパク質でありtetO配列に結合すると下流のプロモーターを活性化する。ドキシサイクリンと結合するとTetRがtetO配列に結合できなくなるためtetO 配列下流のプロモーターは活性化しない。 | |||
=== reverse tTA: reverse tetracycline transactivator === | === reverse tTA: reverse tetracycline transactivator === | ||