「オピオイド受容体」の版間の差分

Neuroblastoma x glioma hybrid NG108-15細胞におけるDORを介したcyclic AMP (cAMP) 産生抑制の報告を起源として発展してきた<ref name=Law1993><pubmed>8388986</pubmed></ref>。3種類のオピオイド受容体蛋白質はいずれもアミノ基側末端が細胞外、カルボキシル基側末端が細胞内に存在するG蛋白質共役型受容体（GPCR）の一種である。オピオイド受容体にリガンドが結合するとG蛋白質の一種であるGi/Go蛋白質を介してアデニル酸シクラーゼ (AC) の機能を抑える。これによりセカンドメッセンジャーであり、プロテインキナーゼの活性化を促すcAMP の産生が抑制されることになる。さらにはK+チャネルの開口促進やCa2+チャネルの開口抑制、細胞機能の調節を行う。すなわち、グルタミン酸やサブスタンス P などの疼痛伝達に重要な神経伝達物質の放出を抑制することで末梢性鎮痛効果を生じるとされている。

精製 MORと精製GiやGo蛋白質との再構成研究から、オピオイドアゴニストのオピオイド受容体への結合親和性は、G蛋白質非存在下では低いが、G蛋白質との再構成により上昇することが示された<ref name=Ueda1988><pubmed>2842801</pubmed></ref><ref name=Ueda1990><pubmed>2154551</pubmed></ref>。この事実はオピオイド受容体がアゴニストにより活性化されるとG蛋白質が受容体から乖離することでアゴニストの受容体親和性が低下し、結果としてオピオイド受容体シグナル伝達のturn offが生じると理解される。一方、細胞内シグナル伝達におけるturn off機構としてはオピオイド受容体がCキナーゼや受容体キナーゼによりリン酸化を受けることにおいても観察される。後者におけるリン酸化はβアレスチンにより固定される。すなわち、リクルートされたβアレスチンがリン酸化受容体に結合することにより、オピオイド受容体とG蛋白質との相互作用が阻害される。さらに、βアレスチンはオピオイド受容体の内在化および脱感作を促すとともに、それ自身によりc-Src、Akt、ERKなどのいくつかのシグナル伝達分子の足場となり、G蛋白質非依存性の、あるいは、G蛋白質機能を抑制するシグナル伝達機構が存在することも報告されている（図1）。こうした G 蛋白質非依存性シグナルが副作用に関わるという知見から、G蛋白質偏向性アゴニストが副作用の少ない治療薬開発のために重要であるという考え方（バイアスドアゴニスト仮説）がある。しかしながら、βアレスチンを介するシグナルの生理的意義については、未だ議論の渦中である。<ref name=Bruchas2010><pubmed>20401607</pubmed></ref><ref name=Che2023><pubmed>37995655</pubmed></ref><ref name=Coutens2023><pubmed>36584882</pubmed></ref><ref name=Ju2025><pubmed>40076488</pubmed></ref><ref name=Kelly2023><pubmed>36170657</pubmed></ref><ref name=Lefkowitz2005><pubmed>15845844</pubmed></ref><ref name=Martyn2019><pubmed>30673555</pubmed></ref><ref name=Shukla2011><pubmed>21764321</pubmed></ref>。

過去 20 年間で、薬理学的ツールの改良と遺伝学的アプローチの発展により、オピオイドの細胞応答における、各オピオイド受容体の役割が明らかになった <ref name=Chu Sin Chung2013><pubmed>23764370</pubmed></ref><ref name=Gaveriaux-Ruff2013><pubmed>23448470</pubmed></ref><ref name=Lutz2013><pubmed>23219016</pubmed></ref><ref name=Sauriyal2011><pubmed>21208657</pubmed></ref><ref name=Shippenberg2008><pubmed>19128202</pubmed></ref>。

MORはモルヒネの鎮痛作用に最も関連がある受容体であるが、内因性オピオイドペプチドでは、エンケファリンやβエンドルフィンに対して高親和性を有する。一方、ダイノルフィンに対しては低親和性である。

MORの活性化は激しい痛みを強力に抑制することから、術後および癌性疼痛管理の主なターゲットとされている <ref name=Zollner2007><pubmed>17087119</pubmed></ref>。オピオイド性の鎮痛薬の多くはMORに対して強く結合するものである。また、MOR は報酬処理でも中心的な役割を果たし<ref name=Le Merrer2009><pubmed>19789384</pubmed></ref>、依存性行動における主な要因となるなど、臨床的に有用なオピオイドと乱用されるオピオイドの鎮痛特性と依存性の両方を媒介すると考えられている。受容体の中でもさらに鎮痛や多幸感などに関与するμ1受容体と呼吸抑制や掻痒感、鎮静、依存性形成などに関与するμ2受容体が存在する。μ3受容体というものも報告されているが <ref name=Cadet2003><pubmed>12734358</pubmed></ref>、その機能はよく分かっていない。

受容体の輸送と調節については、リガンド依存性の特徴を表す。すなわち、モルヒネは受容体の内在化を促進しないが、ペプチド性 MORアゴニストDAMGO は強力な内在化を引き起こす <ref name=Finn2001><pubmed>11738029</pubmed></ref>。すなわち、内在化受容体は、細胞膜にリサイクルされることで、応答性を維持していると考えられている。MOR関連末梢性鎮痛評価においてモルヒネの繰り返し投与による脱感作はプロテインキナーゼC (PKC)阻害剤で解除されるがDAMGOは脱感作を示さない <ref name=Inoue2000><pubmed>10773042</pubmed></ref>。モルヒネに結合した受容体は、内在化されずにシグナル伝達が持続・変容し、耐性形成を生じさせると考えられている<ref name=Ueda2001><pubmed>11312280</pubmed></ref>。

DORは、IUPHAR 命名法では δ 受容体または DOP 受容体と表される。げっ歯類の mRNA 分布に従って、ヒトの中枢神経系における DOR は、海馬や扁桃体などの皮質領域と辺縁系構造、および基底核と視床下部で発現している <ref name=Chu Sin Chung2013><pubmed>23764370</pubmed></ref><ref name=Peckys1999><pubmed>10336124</pubmed></ref><ref name=Peng2012><pubmed>22356890</pubmed></ref><ref name=Simonin1994><pubmed>7808419</pubmed></ref><ref name=Smith1999><pubmed>10478647</pubmed></ref>。上述した通り、オピオイド受容体の中で最初にクローニングされた受容体である。エンケファリンに対して強い親和性を持つ受容体として発見されたものであり、中枢神経系に広く分布している。

DORは抗不安作用、抗うつ作用、身体・精神依存、あるいは、MORより作用が弱いが鎮痛にも関与している事が知られている。DOR作動薬の作用は拮抗薬BNTXにより遮断されるδ1型と拮抗薬NTBによって拮抗されるδ2型の二つに分けられるとする報告はあるが<ref name=Sofuoglu1993><pubmed>8383271</pubmed></ref><ref name=Thorat1997><pubmed>9399992</pubmed></ref>、δ1、δ2受容体が実際に存在するかどうかは明らかになっていない。

DOR の細胞内局在については、細胞膜に加えて細胞内部位にも存在するとの議論がある<ref name=Cahill2001><pubmed>11745608</pubmed></ref><ref name=Gendron2006><pubmed>16421315</pubmed></ref><ref name=Scherrer2009><pubmed>19524516</pubmed></ref><ref name=Wang2001><pubmed>11312309</pubmed></ref>。いくつかの報告では、慢性的なモルヒネ処置によってラット脊髄後角の細胞表面のDOR の発現が増加することが示されており<ref name=Cahill2001><pubmed>11567050</pubmed></ref>、この効果は MOR 受容体の活性に依存し、MOR阻害により遮断される <ref name=Cahill2001><pubmed>11567050</pubmed></ref>。また、MORと同様に、DOR リガンドによる刺激後、DORのリン酸化およびアレスチンのリクルートによって脱感作される<ref name=Coutens2023><pubmed>36584882</pubmed></ref><ref name=Hasbi1998><pubmed>9572300</pubmed></ref><ref name=Law2000><pubmed>10893226</pubmed></ref>。DOR のリン酸化のうち、C 末端リン酸化がオピオイド受容体の調節に重要であることが示されている。DOR では、Ser363 残基が重要なリン酸化部位である <ref name=Bradbury2009><pubmed>19344370</pubmed></ref><ref name=Guo2000><pubmed>11040053</pubmed></ref>。G 蛋白質結合受容体キナーゼ 2 (GRK2) によって媒介されるこのリン酸化イベントは、脱感作の初期イベントになる<ref name=Guo2000><pubmed>11040053</pubmed></ref><ref name=Pei1995><pubmed>7651349</pubmed></ref>。他のアミノ酸残基も DOR の調節に関与しており、例えば、Thr353 は [D-Ala2、D-Leu5]-エンケファリン (DADLE) を介した DOR のダウンレギュレーションに重要であることがわかっている。また、Leu245 と Leu246 を削除することにより、アゴニスト結合 DOR のリソソームへの輸送が遅延することから、これらは、リソソーム標的化モチーフとして機能していると考えられている <ref name=Cvejic1996><pubmed>8626742</pubmed></ref><ref name=Trapaidze1996><pubmed>8910588</pubmed></ref><ref name=Varga2004><pubmed>15567186</pubmed></ref>。

DOR の活性化により Gi/Go活性化、cAMP 生成の抑制、ERK などのシグナル伝達キナーゼの活性化、電位依存性Ca2+チャネルの抑制、内向き整流性 K+ チャネルの開口などが生じる<ref name=Buzas1998><pubmed>9422352</pubmed></ref><ref name=Childers1991><pubmed>1851914</pubmed></ref><ref name=Kovoor1997><pubmed>9346897</pubmed></ref><ref name=Pei1995><pubmed>7651349</pubmed></ref><ref name=Shahabi1999><pubmed>10376935</pubmed></ref><ref name=Zhang1999><pubmed>10501195</pubmed></ref>。その後、受容体C末端側のリン酸化とβアレスチンのリクルートを経て<ref name=Al-Hasani2011><pubmed>22020140</pubmed></ref><ref name=Cen2001><pubmed>11259507</pubmed></ref>、 DOR はMORと同様に内在化し、リサイクルまたはリソソームで分解される<ref name=Ko1999><pubmed>10366739</pubmed></ref><ref name=Tsao2000><pubmed>10753919</pubmed></ref>。

KORは、IUPHAR 命名法では κ受容体または KOP 受容体と表される。このサブタイプ受容体はダイノルフィンに高親和性を示すオピオイド受容体である。KORは主に中枢神経系に存在し、さまざまな末梢組織にも発現する。中枢神経系では、主に痛みの伝達処理、感情の調節を担っており、扁桃体、視床下部、腹側被蓋野などの報酬経路に関与している。脊髄では、熱痛覚と化学的内臓痛の調節と媒介を担う領域に発現する<ref name=Lobe2025><pubmed>39893986</pubmed></ref>。

KOR の活性化により、鎮痛や鎮咳、幻覚、せん妄、鎮痛、胃腸活動、ショック、体温調節、食欲、心血管系の変化、利尿、精神機能障害など多岐にわたる作用が知られる<ref name=Chavkin2011><pubmed>21116263</pubmed></ref>。Hedonic homeostasisの調節においてはMORと拮抗し、不快および精神異常作用を誘導する点が特徴である。そのため、KORを遮断することにより、ストレス反応と抑うつ状態が軽減される<ref name=Cadet2003><pubmed>12734358</pubmed></ref><ref name=Shippenberg2009><pubmed>19079072</pubmed></ref>。KOR拮抗薬は、うつ病、不安、薬物乱用状態など、多くの神経精神疾患に対する有用性が期待されている<ref name=Lobe2025><pubmed>39893986</pubmed></ref>。また、KOR作動薬であるナルフラフィンは、KORの活性化によって掻痒抑制効果があることが明らかにされており<ref name=Wakasa2004><pubmed>15454345</pubmed></ref>、透析・慢性肝疾患の掻痒治療薬・鎮痒薬として使用されている<ref name=El Daibani2024><pubmed>38960136</pubmed></ref><ref name=Kardon2014><pubmed>24726382</pubmed></ref><ref name=Wakasa2004><pubmed>15454345</pubmed></ref>。加えて、ペンタゾシンやブプレノルフィンなどの麻薬拮抗性鎮痛薬は、このKORに対して親和性を有するものが多い。

KOR の細胞内動態として、リン酸化、脱感作、内在化されるという過程はMORやDOR の調節と共通する特徴を有する。KOR は、アゴニスト依存性の内在化を示す。すなわち、U50,488 およびダイノルフィンA (1-17) によってリン酸化、脱感作、内部化されるが、エトルフィンやレボルファノールなどではリン酸化、脱感作、内在化されない <ref name=Blake1997><pubmed>9109509</pubmed></ref>。さらに、こうしたアゴニスト誘導性の KOR 内在化については、細胞株、受容体種を含む実験条件に依存することが議論されている。例えば、KOR を発現するチャイニーズハムスター卵巣 (CHO) 細胞では、選択的 KOR アゴニスト U50,488 および U69,593 は強力な受容体内在化を引き起こさないが <ref name=Zhang2002><pubmed>12183679</pubmed></ref>、マウス下垂体腫瘍 (AtT20) 細胞およびヒト胎児腎臓 (HEK293) 細胞では、同じリガンドがKOR-GFP 受容体蛋白質の強力な内在化を誘導する<ref name=Bruchas2006><pubmed>16648139</pubmed></ref><ref name=McLaughlin2004><pubmed>14597630</pubmed></ref><ref name=McLaughlin2003><pubmed>12815037</pubmed></ref>。

内因性ペプチドであるダイノルフィンA（1-17）は、MORおよびDORと比較して、KORに対する選択性が最も高い <ref name=Lobe2025><pubmed>39893986</pubmed></ref>。ダイノルフィンによって活性化されると、KORはMOR や DOR と同様にG蛋白質αi/oサブユニットに結合し、アデニル酸シクラーゼ活性の阻害、K+コンダクタンスの増加、Ca2+コンダクタンスの減少など、細胞内で一連のシグナル伝達イベントを生じさせる。また、ERK 1/2、p38MAPK、c-Jun N末端キナーゼ（JNK）などの下流シグナル伝達経路も活性化する <ref name=Lobe2025><pubmed>39893986</pubmed></ref>。

NOR (ORL1とも呼ばれる) は、上記の3つの受容体サブタイプと類似の構造を有するもののリガンドが不明な、いわゆるオーファン受容体であったが、内在性リガンドの探索の結果、脳から発見されたノシセプチン(N/OFQ) の受容体として理解されるようになった。NORは古典的なオピオイドリガンドとは結合せず、逆にN/OFQ はMOR, DOR, KORには結合しない。さらに、NORを介した作用はモルヒネの鎮痛作用に拮抗することも報告されている。このような事実からNOR-リガンドシステムは、古典的なオピオイド受容体とは異なる独立したサブタイプとして分類されている<ref name=Zaveri2016><pubmed>26878436</pubmed></ref>。

NORは活性化されると他のオピオイド受容体同様、環状アデノシン一リン酸（cAMP）の産生を阻害し、電位依存性Ca2+チャネルを閉じ、内向き整流性K+チャネルを開く<ref name=Hawes2000><pubmed>10998529</pubmed></ref><ref name=Knoflach1996><pubmed>8824306</pubmed></ref><ref name=New2002><pubmed>12393946</pubmed></ref><ref name=Vaughan1996><pubmed>8732266</pubmed></ref>。NORの活性化は神経の興奮性を抑制し、神経伝達物質(ノルエピネフリン、ドーパミン、セロトニン、アセチルコリン、グルタミン酸など)の放出を減少させるという報告がある <ref name=Toll2016><pubmed>26956246</pubmed></ref>。

ノシセプチンを末梢皮下や脊髄くも膜下腔に投与したとき、低用量では疼痛過敏を高用量では鎮痛方向の作用を示しいずれもNORのノックアウト(KO)マウスにおいて遮断される<ref name=Inoue1999><pubmed>10490918</pubmed></ref>. NOR-KOマウスは繰り返しモルヒネ投与による鎮痛耐性や身体的依存形成を有意に抑制すること<ref name=Ueda2000><pubmed>11027224</pubmed></ref>からノシセプチンはNMDA受容体機構<ref name=Inoue2003><pubmed>12878694</pubmed></ref>と同様なアンチオピオイド機構を担っている可能性がある。

一方、NOR作動薬の疼痛伝達に対する効果は、作用部位（脊髄上部、脊髄、末梢）と使用される動物モデルに応じて、疼痛促進効果から鎮痛効果まで多岐にわたる<ref name=Pola2024><pubmed>39335430</pubmed></ref><ref name=Toll2016><pubmed>26956246</pubmed></ref>。NOR作動薬はマウスおよびラットの脳室内に投与すると疼痛促進作用を示し、その作用は延髄前部腹内側核のOFF細胞に存在するNORを介した作用であると考えられている。NOR作動薬を脊髄内に注射すると、強力な鎮痛効果を示すが、脊髄において興奮性グルタミン酸作動性疼痛伝達を阻害することによると考えられている。

細胞レベルにおいてオピオイド受容体間での相互作用を示した研究から、ヘテロ二量体として MOR、DOR、KOR、そして NOR から構成されるヘテロ二量体が報告されている<ref name=Fujita2014><pubmed>24916280</pubmed></ref><ref name=Fujita2015><pubmed>24571499</pubmed></ref><ref name=Gomes2016><pubmed>26514203</pubmed></ref>。

最初期に報告されたのは DOR-KOR ヘテロ二量体である。これらの研究報告では、両者の相互作用は、標識された受容体を導入した細胞における共免疫沈降法や生物発光共鳴エネルギー移動アッセイ（BRET）によって解析された。両受容体が発現する細胞特異的に、相互作用が確認されている<ref name=Jordan1999><pubmed>10385123</pubmed></ref><ref name=Ramsay2002><pubmed>11971762</pubmed></ref>。加えて、DOR-KORヘテロ二量体発現細胞では、DOR や KORに対するアゴニスト単独の結合親和性は低下する。一方で、それぞれの受容体へのリガンドを組み合わせて作用させると、結合親和性や細胞内シグナルが増加する。すなわち、親受容体とは異なる、ヘテロ二量体独自の薬理学的特徴を有することが示唆された<ref name=Jordan1999><pubmed>10385123</pubmed></ref>。

このヘテロ二量体は、オピオイド受容体ヘテロ二量体の中でも、細胞レベル、動物レベルにおけるその薬理学的特性解析が最もよくなされ、報告されてきた。初期には、組織化学的解析を用いたMOR および DOR の細胞膜上での共局在や、共免疫沈降法、BRET アッセイによって、両者の相互作用が示唆されてきた<ref name=Fujita2014><pubmed>24916280</pubmed></ref><ref name=Fujita2015><pubmed>24571499</pubmed></ref>。薬理学的特性として、ヘテロ二量体化することによって、低用量の DORおよび MOR アゴニストの結合親和性や細胞内シグナルが増強することが見出された。さらに、内因性オピオイドペプチドである endomorphin-1 の結合親和性も増加するなど<ref name=George2000><pubmed>10842167</pubmed></ref><ref name=Gomes2004><pubmed>15044695</pubmed></ref><ref name=Gomes2011><pubmed>21415307</pubmed></ref><ref name=Gomes2000><pubmed>11069979</pubmed></ref><ref name=Kabli2010><pubmed>20977461</pubmed></ref>、親受容体とは異なる、ヘテロ二量体独自の薬理学的特性を有することが示唆される。特に、Gαz との共役や、βアレスチンとの恒常的な会合の可能性、ERK1/2 の持続的な活性化など、非常に特徴的である<ref name=Fan2005><pubmed>16159882</pubmed></ref><ref name=Hasbi2007><pubmed>17941650</pubmed></ref><ref name=Rozenfeld2007><pubmed>17384143</pubmed></ref>。近年、特異的抗体により脳内の内因性 MOR-DOR ヘテロ二量体の発現が確認された。マウス脳内に広く発現分布することがわかっている<ref name=Gupta2010><pubmed>20647592</pubmed></ref>。MOR-DOR ヘテロ二量体特異的リガンドによる薬理作用として、MORと同様の鎮痛作用を示すが、副作用発現は少ない可能性が示唆されている<ref name=Gomes2013><pubmed>23818586</pubmed></ref>。その一方で、MOR-DOR ヘテロ二量体は、モルヒネなどの MOR アゴニストによる鎮痛耐性形成に関与することが知られている<ref name=Fujita2022><pubmed>36291680</pubmed></ref><ref name=Tiwari2020><pubmed>31815916</pubmed></ref>。

上記の他の二量体と同様に、共免疫沈降法やBRET アッセイによって両受容体のヘテロ二量体形成が示唆されている<ref name=Chakrabarti2010><pubmed>21041644</pubmed></ref><ref name=Wang2005><pubmed>15778451</pubmed></ref>。その一方で、MOR-KOR は二量体化を示さないとする報告もあり、その生体内での発現については、議論の渦中である<ref name=Jordan1999><pubmed>10385123</pubmed></ref>。発現するとの報告から、MOR-KOR ヘテロ二量体の形成量は性周期と関連すると考えられている<ref name=Chakrabarti2010><pubmed>21041644</pubmed></ref>。またMOR アゴニストに対してユニークな薬理学的特性を示し、ヘテロ二量体発現細胞では、ホモ二量体発現細胞よりも MOR アゴニストの親和性が低下するが、KOR アゴニストのそれらは変わらない<ref name=Wang2005><pubmed>15778451</pubmed></ref>。ヘテロ二量体の薬理学的性質は、KOR 様の性質が維持されていると考えられている。

標識受容体を導入した細胞における共免疫沈降法によりNORは MORとヘテロ二量体を形成することが明らかにされている<ref name=Evans2010><pubmed>19887453</pubmed></ref><ref name=Wang2005><pubmed>15748148</pubmed></ref>。おそらく細胞内領域の C 末端側が相互作用に重要と考えられている<ref name=Wang2005><pubmed>15748148</pubmed></ref>。加えて最近、蛍光標識された、MOR および NOR特異的リガンドを用いた解析により、両者が相互作用することが証明された<ref name=Bird2022><pubmed>35061679</pubmed></ref>。ヘテロ二量体化することによって、MORアゴニストの結合親和性、アデニル酸シクラーゼ活性、ERK1/2 のリン酸化の程度などが正方向に増加するなど、薬理学的特性に影響する。しかし、二量体化はMOR の交差脱感作を誘導し、DAMGO のアデニル酸シクラーゼ阻害作用を弱めたり、ERK1/2 リン酸化作用を強めたりする<ref name=Wang2005><pubmed>15748148</pubmed></ref>。一方で、NOR 単独発現細胞とヘテロ二量体発現細胞の間でN/OFQ の作用に有意な変化は認められていない。ただし、G蛋白質活性化作用の低下傾向と、ERK1/2 リン酸化作用の遅延傾向は示されている<ref name=Bird2022><pubmed>35061679</pubmed></ref>。

MOR 遺伝子欠損（KO）マウス

いくつかのグループからエクソン1, あるいは エクソン 2や3 を標的として OPRM1遺伝子欠損マウスが作製された<ref name=Loh1998><pubmed>9555078</pubmed></ref><ref name=Sora1997><pubmed>9037090</pubmed></ref>。MOR-KOマウスは、モルヒネやその他のミュー特異的オピオイドリガンドの作用（鎮痛作用、報酬作用、耐性など）が減少または消失することからMORはモルヒネの鎮痛作用やその他の作用に不可欠であることが実証されている<ref name=Loh1998><pubmed>9555078</pubmed></ref><ref name=Roy1998><pubmed>9795212</pubmed></ref>。

DORは、報酬、依存、さらには低酸素性虚血性脳損傷に対する神経保護など、様々なプロセスに関与する <ref name=Chefer2009><pubmed>18704097</pubmed></ref><ref name=Nitsche2002><pubmed>12486185</pubmed></ref>。DOR KO や、内因性リガンドであるプロエンケファリンAの機能遺伝子欠損マウスでは、モルヒネ鎮痛耐性を発現しない。その一方、モルヒネ鎮痛耐性を欠くNMDA受容体欠損近交系マウス129S6系統は、naltrexone 拮抗薬誘発性オピオイド離脱症状を呈する <ref name=Chefer2009><pubmed>18704097</pubmed></ref><ref name=Nitsche2002><pubmed>12486185</pubmed></ref>。

• 疼痛知覚

MOR/DORダブルノックアウトマウスでは、Delta9-テトラヒドロカンナビノール（THC）による低体温作用が減弱し、また、慢性THC投与による低体温作用に対する耐性形成も抑制される。一方で、抗疼痛作用、運動低下作用、それらに対する耐性形成には影響しない。条件付け場所嗜好性パラダイムによるTHCの報酬効果の解析では、THCによる報酬効果、および、離脱症状が変異マウスで有意に減弱することがわかっている<ref name=Castane2003><pubmed>12534979</pubmed></ref>。なお　MOR、DOR、またはKORの単独での欠損マウスでは、THCの急性作用、身体依存は変化しない。

MOR/DOR/KORトリプルノックアウトマウスを用いた検討から、ヒトのレストレスレッグス症候群（RLS）（夜間）に類似した安静時（日中）の活動亢進と覚醒確率増加傾向が示されることが報告されている <ref name=Lyu2019><pubmed>31376441</pubmed></ref>。さらに、血清鉄濃度の低下、ヒトのRLSと同様のドーパミン代謝機能不全、そして熱刺激に対する反応潜時の延長も示されている <ref name=Lyu2019><pubmed>31376441</pubmed></ref>。

先述した、MOR/DORヘテロ多量体化の検出を行うため、redMOR/greenDORダブルノックイン（KI）マウスが作成・解析されている<ref name=Erbs2015><pubmed>24623156</pubmed></ref>。DOR遺伝子座に強化型緑色蛍光タンパク質（EGF）を導入したDOR-eGFP KIマウスや赤色蛍光mCherryタンパク質と融合したMOR-mCherryを導入したKIマウス系統が作製された<ref name=Scherrer2006><pubmed>16766653</pubmed></ref>。変異マウスは、本来の受容体の代わりに、C末端にeGFPを融合した完全機能受容体（DOReGFP）を発現し、行動や薬物反応に目立った変化は見られなかった。 DOR-eGFP KIマウスでは DOR はDRG<ref name=Scherrer2009><pubmed>19524516</pubmed></ref>、腸管神経細胞<ref name=Poole2011><pubmed>21699782</pubmed></ref>、そして海馬<ref name=Erbs2012><pubmed>22750239</pubmed></ref>に確認されている。前脳では、MORとDORは主に別々のニューロンで検出されているが、摂食行動や性行動、あるいは嫌悪刺激に対する知覚、および反応に関わる生存に不可欠な皮質下の神経では、共局在している<ref name=Erbs2015><pubmed>24623156</pubmed></ref>。DOR-eGFPは、基底状態では主に細胞膜に局在するが<ref name=Pradhan2009><pubmed>19412545</pubmed></ref><ref name=Scherrer2006><pubmed>16766653</pubmed></ref>、MOR-mCherryの蛍光シグナルはニューロン内部で強く、細胞膜上ではむしろ弱い <ref name=Pradhan2009><pubmed>19412545</pubmed></ref><ref name=Scherrer2006><pubmed>16766653</pubmed></ref>。