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<br>分泌小胞の直径測定シナプス小胞から大型有芯小胞に至るまで、小胞の直径計測に有効である <ref><pubmed> 16150799 </pubmed></ref>。水溶性色素(赤色 sulforhodamine B) とFM1-43を細胞外液に同時に与え、開口放出を誘発すると、水溶性色素は小胞内部に進入し、FM1-43は細胞外膜から小胞内膜へ拡散するため、開口放出した小胞が両色素で描出される。この際2光子励起画像を取得し、双方の色素の増加分の比を求めると小胞直径が計算される(直径=6 ΔSRB/ΔFM1-43)。本法は色素濃度やレンズ特性(point-spread function)によらず、シナプス小胞のような光学解像度以下の器官の計測にも応用可能である。  
<br>分泌小胞の直径測定シナプス小胞から大型有芯小胞に至るまで、小胞の直径計測に有効である <ref><pubmed> 16150799 </pubmed></ref>。水溶性色素(赤色 sulforhodamine B) とFM1-43を細胞外液に同時に与え、開口放出を誘発すると、水溶性色素は小胞内部に進入し、FM1-43は細胞外膜から小胞内膜へ拡散するため、開口放出した小胞が両色素で描出される。この際2光子励起画像を取得し、双方の色素の増加分の比を求めると小胞直径が計算される(直径=6 ΔSRB/ΔFM1-43)。本法は色素濃度やレンズ特性(point-spread function)によらず、シナプス小胞のような光学解像度以下の器官の計測にも応用可能である。  
<br>文献  1)Cochilla AJ, Angleson JK, Betz WJ Monitoring secretory membrane with FM1-43 fluorescence. Annu Rev Neurosci: 1999, 22; 1-10 [PubMed10202529]
2)Wu Y, Yeh FL, Mao F, Chapman ER Biophysical characterization of styryl dye-membrane interactions. Biophys J: 2009, 97(1); 101-109 [PubMed 19580748]
3)Rizzoli, SO &amp; Betz WJ The structural organization of the readily releasable pool of synaptic vesicles. Science: 2004, 303(5666); 2037-2039 [PubMed 15044806]
4) Branco T, Staras K, Darcy KJ, Goda Y Local dendritic activity sets release probability at hippocampal synapses. Neuron: 2008, 59(3); 475-485 [PubMed 18701072]
5)Zakharenko SS, Zablow L, Siegelbaum SA Visualization of changes in presynaptic function during long-term synaptic plasticity. Nat Neurosci: 2001, 4(7); 711-717 [PubMed 11426227]
6) Betz WJ &amp; Bewick GS Optical analysis of synaptic vesicle recycling at the frog neuromuscular junction. Science: 1992, 255(5041); 200-203 [PubMed 1553547]
7) Klingauf J, Kavalali ET, Tsien RW Kinetics and regulation of fast endocytosis at hippocampal synapses. Nature: 1998, 394(6693); 581-585 [PubMed 9707119]
8) Zenisek D, Steyer JA, Feldman ME, Almers W A membrane marker leaves synaptic vesicles in milliseconds after exocytosis in retinal bipolar cells. Neuron&nbsp;:2002, 35(6): 1085-1097 [PubMed 12354398]
9) Zenisek D, Steyer JA, Almers W Transport, capture and exocytosis of single synaptic vesicles at active zones. Nature: 2000, 406(6798); 849-854 [PubMed 10972279]
10) Cochilla AJ, Angleson JK, Betz WJ Differential regulation of granule-to-granule and granule-to-plasma membrane fusion during secretion from rat pituitary lactotrophs. J Cell Biol: 2000, 150(4); 839-848 [PubMed 10953007]
11) Kasai H, Hatakeyama H, Kishimoto T, Liu TT, Nemoto T, Takahashi N A new quantitative (two-photon extracellular polar-tracer imaging-based quantification (TEPIQ)) analysis for diameters of exocytic vesicles and its application to mouse pancreatic islets. J Physiol: 2005, 568(Pt 3); 891-903 [PubMed 16150799]
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(執筆者:高橋倫子、河西春郎、 担当編集委員:柚崎通介) 
(執筆者:高橋倫子、河西春郎、 担当編集委員:柚崎通介) 
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