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== 参考文献 == | == 参考文献 == | ||
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2015年1月16日 (金) 15:03時点における最新版
高森 茂雄
同志社大学 脳科学研究科
DOI：10.14931/bsd.5139 原稿受付日：2014年4月29日 原稿完成日：2015年1月16日
担当編集委員：河西 春郎（東京大学 大学院医学系研究科）
英語名：vesicular GABA transporter, vesicular inhibitory amino acid transporter
英語略語名：VGAT, VIAAT
同義語：小胞型抑制性神経伝達物質トランスポーター
哺乳類中枢神経系における抑制性神経伝達物質はγ—酪酸（GABA）である。GABAをシナプス小胞内腔に輸送するトランスポーターは、線虫のGABA神経伝達を司る遺伝子の1つであるunc-47の相同遺伝子として1998年にクローニングされ、VGAT（vesicular GABA transporter）と名付けられた。VGATは脳幹・脊髄系の抑制性伝達物質であるグリシンも基質とするため、VIAAT（vesicular inhibitory amino acid transporter）とも呼ばれる。VGATは、液胞型プロトンATPaseによって形成されるプロトン（H+）電気化学勾配を駆動力として、GABAやグリシンを小胞内に濃縮する。VGATノックアウトマウスは胎生致死であり、臍帯ヘルニアや口蓋裂などGAD67（GABA合成酵素）ノックアウトマウスと類似した所見を呈することから、GABAシグナリングの発生過程での重要性が明らかになった。
分子クローニングと構造
運動失調（uncordinate）を呈する幾つかの線虫の変異体のうち、unc-47はGABAニューロンのシナプス終末における機能破綻が示唆されていた[1] [2]。1998年にUNC-47遺伝子の哺乳類相同遺伝子がクローニングされ、遺伝子産物が抑制性シナプス終末に存在しシナプス小胞へのGABA充填に関わることが示され、小胞GABAトランスポーターと名付けられた[3]。また、UNC-47遺伝子は脳幹・脊髄の主な抑制性神経伝達物質であるグリシンも輸送することから、小胞型抑制性神経伝達物質トランスポーター（VIAAT）とも呼ばれる[4]。
SLC32ファミリーに属し、SCL32A1と呼ばれるが、現在までに同じファミリーに属する相同遺伝子が同定されていない[5]。また、C末端側の配列が異なるスプライシング変異体の存在が知られている[6]。
タンパク質の一次構造から、VGAT/VIAATは約500個余りのアミノ酸からなり、N末端が細胞質側、C末端が小胞内腔にある9回膜貫通型タンパク質であることが示唆されている[7]。脳のサンプルのウェスタンブロットでは、55KDaと45KDa付近に二本の主要なバンドとして観察されるが、これらはリン酸化による修飾の違いである[8]。リン酸化部位の特定はされていない。スプライシング変異体やリン酸化の違いによる機能の差異は不明である。
発現分布
中枢神経系のGABAニューロンとグリシンニューロンの神経終末に局在する[9]。GABA合成酵素であるグルタミン酸脱炭酸酵素（glutamic acid decarboxylase, GAD）よりも神経終末に局在するので、抑制性シナプス終末の分子マーカーとして免疫組織化学的な同定によく用いられている。また、VGATのC末端側が小胞内腔にあることを利用して、C末端を認識する抗体を培養細胞や生体脳に暴露させることで、GABAシナプス終末を特異的に蛍光標識する技術も開発されている[7]。更に、神経系以外でも下垂体分泌細胞、松果体や膵臓のグルカゴン分泌細胞などでもVGAT/VIAATの発現が確認されているが、生理機能は明らかではない[10] [11] [12] [13] [14]。
GABA輸送機構
GABAおよびグリシンのシナプス小胞内への輸送は、プロトンの電気化学勾配を駆動力とする二次輸送である[15] [16] [17]。プロトン勾配は、液胞型プロトンATPaseが細胞質から小胞内腔にプロトンを運ぶことにより、膜電位勾配（小胞内が+）とpH勾配（小胞内が酸性）が形成される。グルタミン酸の輸送は、主に膜電位勾配、アセチルコリンやモノアミン類の輸送は主にpH勾配によって駆動されることが知られているが、GABAおよびグリシンの輸送は丁度その中間に位置しているとされている[18]。基質とプロトンとの共役を含めVGAT/VIAATの詳細な輸送メカニズムは不明であるが、最近、VGAT/VIAATの再構成実験の結果から、VGAT/VIAATは膜電位勾配を駆動力として使い、GABAとCl–を1：2で輸送する共輸送体であるとする新しい仮説が提唱された[19]（図1）。
遺伝子改変マウスと生理機能
VGAT/VIAATノックアウトマウスは胎生致死であり、胎生期18日目以降にGAD67ノックアウトマウスと類似した臍帯ヘルニアと口蓋裂の所見が認められる[20] [21]。このことからGABAあるいはグリシンが司るシグナル伝達は胎生期の発達に不可欠であることが示された。VGAT/VIAATノックアウトマウスでは、IPSCが顕著に減弱しているが、微小IPSCは振幅・頻度が野生型に比べて激減するものの、若干検出される[21]。このIPSCがVGAT/VIAAT以外の未知の小胞型GABAトランスポーターによるものなのか、あるいはVGAT/VIAATに依存しないGABA再充填メカニズムや非小胞型GABA放出によるものなのかは不明である。
参考文献
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