33
回編集
「ミカエリス・メンテンの式」の版間の差分
細
編集の要約なし
細 (→誘導法) |
Atsuhikoishida (トーク | 投稿記録) 細編集の要約なし |
||
| 20行目: | 20行目: | ||
酵素は生体内の各種の化学反応を円滑に行わせるための生体触媒であり、脳内においても情報伝達や物質代謝など、あらゆる生化学反応に関わっている。そのため生体を理解する上で、個々の酵素の性質を明らかにすることは極めて重要である。1992年に[[ジーンターゲティング]]の手法を用いて、[[空間記憶]]に関わる酵素として[[CaMキナーゼⅡ]]が初めて特定された<ref><pubmed>1378648</pubmed></ref><ref><pubmed>1321493</pubmed></ref>が、この輝かしい研究成果も、それを遡ること十数年に渡る本酵素に関する地道で精力的な研究の積み重ね<ref><pubmed>12045104</pubmed></ref>があったればこそのものであろう。 | 酵素は生体内の各種の化学反応を円滑に行わせるための生体触媒であり、脳内においても情報伝達や物質代謝など、あらゆる生化学反応に関わっている。そのため生体を理解する上で、個々の酵素の性質を明らかにすることは極めて重要である。1992年に[[ジーンターゲティング]]の手法を用いて、[[空間記憶]]に関わる酵素として[[CaMキナーゼⅡ]]が初めて特定された<ref><pubmed>1378648</pubmed></ref><ref><pubmed>1321493</pubmed></ref>が、この輝かしい研究成果も、それを遡ること十数年に渡る本酵素に関する地道で精力的な研究の積み重ね<ref><pubmed>12045104</pubmed></ref>があったればこそのものであろう。 | ||
酵素の生化学的研究をおこなうにあたっては、酵素の性質を定量的に扱うことが大前提となる。その理論的基盤となるものが、1913年に[[wj:レオノール・ミカエリス|L. Michaelis]]と[[wj:モード・メンテン|M. L. Menten]]によって[[wj:インベルターゼ|インベルターゼ]] | 酵素の生化学的研究をおこなうにあたっては、酵素の性質を定量的に扱うことが大前提となる。その理論的基盤となるものが、1913年に[[wj:レオノール・ミカエリス|L. Michaelis]]と[[wj:モード・メンテン|M. L. Menten]]によって[[wj:インベルターゼ|インベルターゼ]]に関する研究において導かれたミカエリス・メンテンの式である。この式は、以下に詳述するように、酵素基質複合体が迅速に形成され、尚且つ結合と解離の平衡状態にあることなどを仮定した反応モデルに基づいて導かれたものであるが、発表当時は酵素の化学的実体が未だ明確にされてはいなかった時代であった。そのような時代に数理モデルに基づいて式が確立され、それが１００年以上たった今日でも未だ各方面で利用されているというのは、理論よりも実験が先行する生化学分野においては極めて珍しい例ではなかろうか。ちなみにMentenは当時としては珍しい女性研究者である<ref>'''鈴木紘一、笠井献一、宗川吉汪 監訳 (2008).'''<br>ホートン生化学 第4版 ''東京化学同人 (東京）''</ref>。さらに1925年に[[w:George Edward Briggs|G. E. Briggs]]と[[wj:J・B・S・ホールデン|J. B. S. Haldane]]が、定常状態近似と呼ばれる、より一般化された仮定を用いて同じ式を導出した。<math>K_m</math>の定義が異なっているので、両者は厳密には別の式であるが、形式が全く同じであるので、実際には混同して用いられることが多い。 | ||
==誘導法== | ==誘導法== | ||
| 37行目: | 37行目: | ||
<br> ここで酵素の全濃度<math>[E_{sub}]</math>は | <br> ここで酵素の全濃度<math>[E_{sub}]</math>は | ||
<br> <math>[ | <br> <math>[E]_0 = [E] + [ES]\,</math> (4) | ||
<br> (2)(4)より<math>[E]</math>を消去して整理すると | <br> (2)(4)より<math>[E]</math>を消去して整理すると | ||
<br> <math> [ES] = \frac{[ | <br> <math> [ES] = \frac{[E]_0[S]}{K_d +[S]}</math> (5) | ||
<br> これを(3)に代入すれば | <br> これを(3)に代入すれば | ||
<br> <math> v = k_3[ES] = \frac{k_3[ | <br> <math> v = k_3[ES] = \frac{k_3[E]_0[S]}{K_d +[S]}</math> (6) | ||
<br> ここで<math>v = k_3[ | <br> ここで<math>v = k_3[E]_0 = V_{max}</math>、<math>K_d = K_m</math>とおくと | ||
<br> <math>v = k_3[ES] = \frac{V_{max}[S]}{K_m +[S]}</math> (7) | <br> <math>v = k_3[ES] = \frac{V_{max}[S]}{K_m +[S]}</math> (7) | ||
| 59行目: | 59行目: | ||
<br> <math>\frac{d[ES]}{dt} = 0 = k_1[E][S] - k_2[ES] -k_3[ES]</math> (8) | <br> <math>\frac{d[ES]}{dt} = 0 = k_1[E][S] - k_2[ES] -k_3[ES]</math> (8) | ||
<br> ここで上記と同様に酵素の全濃度<math>[ | <br> ここで上記と同様に酵素の全濃度<math>[E]_0</math>は | ||
<br> <math>[ | <br> <math>[E]_0= [E] + [ES]\,</math> (9) | ||
<br> (8)(9)より<math>[E]</math>を消去すると | <br> (8)(9)より<math>[E]</math>を消去すると | ||
<math>[ES] = \frac{k_1[ | <math>[ES] = \frac{k_1[E]_0[S]}{k_1[S]+(k_2 + k_3)}</math> (10) | ||
<br> 酵素反応の初速度<math>v</math>は | <br> 酵素反応の初速度<math>v</math>は | ||
| 75行目: | 75行目: | ||
<br> <math>v = \frac{k_1k_3[E_0][S]}{k_1[S]+(k_2 + k_3)} = \frac{k_3[E_0][S]}{[S]+\frac{k_2 + k_3}{k_1}}</math> (12) | <br> <math>v = \frac{k_1k_3[E_0][S]}{k_1[S]+(k_2 + k_3)} = \frac{k_3[E_0][S]}{[S]+\frac{k_2 + k_3}{k_1}}</math> (12) | ||
<br> ここで <math>(k_2+k_3) / k_1 = K_m</math>、<math>k_3[ | <br> ここで <math>(k_2+k_3) / k_1 = K_m</math>、<math>k_3[E]_0 = V_{max}</math>とおくと | ||
<br> <math>v = k_3[ES] = \frac{V_{max}[S]}{K_m +[S]}</math> (13) | <br> <math>v = k_3[ES] = \frac{V_{max}[S]}{K_m +[S]}</math> (13) | ||
<br> となり、(7)式と同じ式が得られる。 (13)式は厳密にはブリッグス・ホールデンの式と言うが、 (7)式と同じ形であるので実際にはミカエリス・メンテンの式と言うことが多い。また、(13)式の<math>K_m</math>もミカエリス定数と言うが、(7)式の場合と異なり、ES complexの解離平衡定数<math> | <br> となり、(7)式と同じ式が得られる。 (13)式は厳密にはブリッグス・ホールデンの式と言うが、 (7)式と同じ形であるので実際にはミカエリス・メンテンの式と言うことが多い。また、(13)式の<math>K_m</math>もミカエリス定数と言うが、(7)式の場合と異なり、ES complexの解離平衡定数<math>K_d</math>とは一致しない。<math>k_2>>k_3</math>の場合にのみ、<math>K_m\approx k_2/k_1</math>となって<math>K_d</math>と一致するのであるが、多くの場合、(13)式の<math>K_m</math>も酵素と基質の親和性の尺度を表すと考えてよい。実験的には、(13)式の<math>K_m</math>も(7)式の場合と同様、基質濃度無限大の時の最大反応速度<math>V_{max}</math>の1/2の速度を与える基質濃度として定義される。 | ||
== ミカエリス・メンテンプロット == | == ミカエリス・メンテンプロット == | ||