「フォリスタチン」の版間の差分

英： follistatin

フォリスタチンは、下垂体前葉からの卵胞刺激ホルモン（FSH）分泌を抑制する糖タンパク質として発見された分子量31〜39 kDaの一本鎖構造を持つタンパク質である。スプライシングによりFS315とFS288の2つのアイソフォームが存在し、さらに分解産物であるFS303も生体内に確認されている。フォリスタチンはアクチビンと高親和性で結合し、アクチビンの受容体への結合を阻害してシグナル伝達を遮断することで、アクチビンの作用を抑制する。また、マイオスタチンやGDF11(growth differentiation factor 11)、さらには一部の骨形成因子（BMP）にも結合し、これらの阻害因子としても機能することが分かっている。一方で、インヒビンにも弱く結合するが、その生理活性を阻害する作用はない。フォリスタチンは特徴的なフォリスタチンドメインを持ち、TGF-βファミリーとは異なる構造を有するため、両者を区別する必要がある。

ブタの卵胞液からインヒビンを精製する過程で、インヒビンとは異なった分画に下垂体前葉培養系でFSHの分泌を抑制する分子量31〜39kDaのシステインに富んだ一本鎖糖タンパク質が発見され、フォリスタチンと命名された <ref name=Ueno1987><pubmed>3120188</pubmed></ref>。FSHの分泌を抑制する作用はインヒビンと類似している。その後の解析から、アクチビンに高親和性 (Kd:500 pM程度)で結合しその作用を阻害することがわかり、その機能が解明された <ref name=Nakamura1990><pubmed>2106159</pubmed></ref>。TGF-βファミリー分子に細胞外分泌型の阻害結合分子があることが最初にわかった例である。TGF-βファミリー分子であるBMPの機能を阻害するコーディン、ノギンなどのモデルケースとなった。フォリスタチンは、卵巣や卵胞液でアクチビンと複合体を形成しているが、フォリスタチンから遊離したアクチビンは生理活性を示すようになる。フォリスタチンは、アクチビンA, B, ABとの結合と阻害活性が強力であるが、次に親和性が高いのがマイオスタチン、GDF11であり、フォリスタチンはこれらの分子も阻害する。

フォリスタチン遺伝子はヒトを含めて種間でよく保存されており、６個のエクソンで構成されている。分子内にシステインに富んだ３個のフォリスタチンドメイン (FSD)を持つ糖付加ポリペプチドをコードする。６番目のエクソンのスプライシングの違いにより、FS315とFS288の２つのバリアントが産生される。FS288は細胞との結合性が高く、アクチビン結合能と阻害活性がFS315より強い <ref name=Shimasaki1988><pubmed>3380788</pubmed></ref> <ref name=Hashimoto1997><pubmed>9153241</pubmed></ref>。

フォリスタチンは、アクチビンと結合していないフリーの状態では、カルボキシル末端の酸性領域とFSD1の塩基性領域/ヘパリン結合領域とが相互作用しFS288よりもコンパクトな高次構造を取ると考えられている <ref name=Lerch2007><pubmed>17409095</pubmed></ref>。アクチビンと結合すると、その相互作用はなくなり、FS315と類似したオープンな高次構造をとる(図2、3)。

TGF-βファミリーに結合するフォリスタチンのファミリー分子としては、FSTL3(FLRG)が知られている。FSTL3は263個のアミノ酸からなるペプチドホルモンで、FSTL3はフォリスタチンと異なり、N末端ドメイン(FSN)と2つのFSドメイン (FSD1, FSD2)しか待たない（図1）。TGF-βファミリーとの結合特性はフォリスタチンと類似している <ref name=Tsuchida2000><pubmed>11010968</pubmed></ref> <ref name=Sidis2006><pubmed>16627583</pubmed></ref><ref name=Tsuchida2001><pubmed>11451568</pubmed></ref>。FSTL3の場合は、FSNでI型受容体結合部位をふさぎ、FSD1, FSD2でII型受容体との結合を阻害する。なお、FSTL3のFSD2のみでアクチビンに結合でき、アクチビンを精製することが可能である <ref name=Tsuchida2000><pubmed>11010968</pubmed></ref> <ref name=Arai2006><pubmed>16737827</pubmed></ref>。FSTN3のFSNはマイオスタチンとの結合に関与しリガンドの特異性に寄与する {Cash, 2012 #161}。質量分析解析によりFSTN3は血液中でマイオスタチンと結合することが報告されている <ref name=Hill2002><pubmed>12194980</pubmed></ref>。アクチビンやマイオスタチンがフォリスタチン、FSTN3から遊離する機構は不明点が多いがプロテアーゼであるトロイド(Tolloid)の関与が報告されている <ref name=Walker2018><pubmed>29348202</pubmed></ref>。フォリスタチンとFSTL3以外にもFSドメインを持つ分子は存在するがアクチビン結合活性は詳しく検証されていない。

FSTL3(FLRG)とアクチビンの複合体　3B4V

FSTL3 (FLRG)とマイオスタチンの複合体　3SEK

フォリスタチンのmRNAとタンパク質は、マウス、ラット、ヒトの多くの組織で発現が見られるが、卵巣、下垂体、腎臓での発現が高い。脳組織、神経系での内在性の発現は少ない。FSTN3(FLRG)のmRNAとタンパク質は、胎盤、骨髄、精巣、腎臓，骨格筋、肺での発現が高い。フォリスタチンは、アクチビン以外にGDF11を阻害する。GDF11は、嗅上皮 における神経新生に関与している。アンタゴニストであるフォリスタチンを欠損させたマウスは、神経新生の劇的な減少を示す <ref name=Wu2003><pubmed>12546816</pubmed></ref>。

フォリスタチンは細胞外でアクチビンA, B, ABと高親和性で結合しその作用を抑制する（図4）。このことからアクチビンの作用を研究するための阻害分子として用いられることが多く有用である。上述のように、フォリスタチンは、アクチビンとモル比２：１で高親和性で結合し強く阻害する。アクチビンとの親和性と阻害活性は相関する。FS288の場合は，ヘパラン硫酸を介して細胞表層のプロテオグリカンに親和性があり、結合したアクチビンを細胞内にエンドサイトーシスの機構で取り込み分解する作用を有する<ref name=Hashimoto1997><pubmed>9153241</pubmed></ref>。FS315にはその作用はない。

ノックアウト(KO)マウスの表現型

　フォリスタチンの全身型のKOマウスが作成されている。肺胞膨張不全のため、生後数時間で死亡するが、成長遅延、横隔膜や肋間筋量の低下、口蓋や肋骨の部分的欠損・形成異常、頬髭と歯の異常、皮膚では光沢を持ち張りのある表現型が見られる <ref name=Matzuk1995><pubmed>7885475</pubmed></ref>。これらの表現型は、フォリスタチンがアクチビンのみならず他のTGF-βファミリーの活性を生体内で制御していることを示している。筋量低下はマイオスタチン阻害が解除されたためと推測される。

　FSTL3(FLRG)のKOマウスは、成体まで生存するが、膵ベータ細胞は過形成を示し、膵島の数と大きさが増す。それに伴い、内臓脂肪量は低下し、耐糖能は改善しインスリン感受性が促進される。また、肝硬変と軽度高血圧を示すが、筋量や体重には変化は見られない <ref name=Mukherjee2007><pubmed>17229845</pubmed></ref>。

発生過程において、セグメント構造を示す後脳原基の菱形脳において、フォリスタチンは偶数の菱形脳 (r2, 4, 6)で発現するがr3では発現しない。このことから、Krox-20により転写抑制されると考えられている <ref name=Seitanidou1997><pubmed>9256343</pubmed></ref>。フォリスタチンの成体の神経系での発現は低い。前脳特異的な発現を示すαCaMKIIプロモーターを用いることで作成されたフォリスタチンの過剰発現遺伝子改変マウスでは、オープンフィールドテストや明暗試験、新規物体認識試験の結果から活動性の低下と不安行動の増加が報告されている。さらに、神経細胞新生や生存の低下が見られる。これらの表現型はアクチビン阻害によるものと考えられている <ref name=Ageta2008><pubmed>18382659</pubmed></ref>。アクチビンは海馬歯状回やCA1での後期長期増強(L-LTP)に必須であるが、フォリスタチンはそれを阻害する <ref name=Ageta2010><pubmed>20332189</pubmed></ref>。獲得された記憶は初期は海馬依存性であり、やがて皮質で記憶形成される。成人における神経新生は、海馬依存的な連合恐怖記憶に関係する。また、フォリスタチンを前脳特異的に強制発現させたマウスでは、海馬での神経新生が抑制されており、海馬依存性の記憶の長期維持が促進される <ref name=Kitamura2009><pubmed>19914173</pubmed></ref>。

ヒトへのマイオスタチン阻害剤投与の治験では筋肥大効果は奏功を示していないのが現状である <ref name=Wagner2020><pubmed>32773450</pubmed></ref> <ref name=Suh2020><pubmed>32911580</pubmed></ref>。ヒトを含めた霊長類では、筋肉量の調節はアクチビンとマイオスタチンの両者によって制御されている可能性が示唆されており、アクチビンAがより重要ではないかと考察されている <ref name=Latres2017><pubmed>28452368</pubmed></ref>。

• 参考文献