「メチル化CpG結合タンパク質2」の版間の差分

辻村啓太

元名古屋大学大学院理学研究科附属ニューロサイエンス研究センター・脳機能発達制御学グループ

 

英：Methyl-CpG binding protein 2

　Methyl-CpG binding protein 2 (MeCP2)は、1992年にBirdらによって哺乳類のメチル化されたDNAに強い親和性を持って結合するタンパク質として初めて同定され<ref name=Lewis1992><pubmed>1606614</pubmed></ref> (Lewis JD et al., Cell, 69, 905-914, 1992)、その後の研究により、MeCP2がメチル化された標的遺伝子に結合し、その遺伝子発現を抑制する活性を持つことが報告された<ref name=Nan1997><pubmed>9038338</pubmed></ref> (Nan X et al., Cell, 88, 471-481, 1997)。一方で1999年、Hudaらのグループにより進行性の神経症状と発達遅延を特徴とする重度の神経発達症・レット症候群の女児患者がX染色体に存在するMECP2遺伝子に変異を有することが示され、MECP2がレット症候群の原因遺伝子であることが明らかとなった<ref name=Amir1999><pubmed>10508514</pubmed></ref> (Amir RE et al., Nat Genet, 23, 185-188, 1999)。2005年には重度の精神遅滞と進行性の神経症状を呈する複数の男児患者らにおいてMECP2遺伝子の重複が見出され、MECP2遺伝子の重複がレット症候群とは異なる神経発達症・MECP2重複症候群を引き起こすことが報告された<ref name=VanEsch2005><pubmed>16080119</pubmed></ref><ref name=Meins2005><pubmed>15689435</pubmed></ref> (Van Esch H et al., Am J Hum Genet, 77(3), 442-53, 2005; Meins M et al., J Med Genet, 42(2), e12, 2005)。これらの報告により、MeCP2はエピジェネティクスと脳機能・神経疾患を結びつける分子として注目を集め世界中で精力的に研究されるようになった。現在までに、MECP2遺伝子の異常はレット症候群やMECP2重複症候群だけでなく、広範な神経疾患患者にも認められることが続々と明らかになっており、MeCP2の機能を明らかにすることは脳機能や幅広い神経疾患病態の解明に寄与すると考えられている<ref name=Chahrour2007><pubmed>17988628</pubmed></ref> (Chahrour M & Zoghbi HY Neuron, 56, 422-437, 2007)。

　MECP2遺伝子は4つのエクソンから成り、エクソン2の選択的スプライシングにより2つの異なるアイソフォームをコードしている(図1)。MECP2aによってコードされるMeCP2-e1アイソフォームは、エクソン1によってコードされる24アミノ酸を含み、エクソン2によってコードされる9アミノ酸を欠いている。一方、MECP2bによってコードされるMeCP2-e2アイソフォームの転写開始部位はエクソン2にある。さらに、MECP2遺伝子には複数のポリアデニル化部位を含む保存性の高い3’末端非翻訳領域があり、これにより代替的に4つの異なる転写産物を産生する<ref name=Chahrour2007><pubmed>17988628</pubmed></ref> (Chahrour M & Zoghbi HY Neuron, 56, 422-437, 2007)。

図1: MECP2遺伝子から発現する二つのアイソフォーム

MECP2-e1アイソフォームは選択的スプライシングによりエクソン2が除去される。MECP2-e2アイソフォームはエクソン2のATGより翻訳される。

　メチル化DNA結合ドメイン(MBD)、転写抑制ドメイン(TRD)、NCOR-SMRT interaction domain (NID)ドメイン、3つのAT-hookドメインなどの機能ドメインを有している<ref name=Lyst2015><pubmed>25732612</pubmed></ref> (Lyst MJ & Bird A, Nat Rev Genet, 16(5), 261-75, 2015)(図2)。MeCP2はMBDを介して高度にメチル化されたヘテロクロマチン領域と相互作用する。転写抑制ドメインはMeCP2の転写抑制活性に重要なドメインであり、TRD内に位置するNIDを介してNCOR-SMRT転写抑制複合体と相互作用し標的遺伝子の転写を抑制する。AT-hookドメインはAT配列が豊富なDNA領域への相互作用を媒介する機能ドメインであり遺伝学的にMECP2の機能に重要な役割を果たしていることが示されている<ref name=Baker2013><pubmed>23452848</pubmed></ref> (Baker SA et al., Cell 152(5), 984-996, 2013)。

　MBDドメインによるメチル化DNAへの結合様式については結晶構造解析により原子レベルでの研究が報告されている。関連タンパク質MBD1のMBDとメチル化DNAとの複合体の溶液構造は、MBD内の疎水性残基のパッチによって特異的結合が媒介されることが示唆された<ref name=Ohki2001><pubmed>11371345</pubmed></ref> (Ohki I et al., Cell 105, 487-497, 2001)。しかしながら、その後の研究によりDNAと結合したMeCP2 MBDの共結晶構造から、結合特異性はDNAの主溝(Major Groove)のメチル化依存的な水和の認識によってもたらされることが示唆されている<ref name=Ho2008><pubmed>18313390</pubmed></ref> (Ho KL et al., Mol Cell 29, 525-531, 2008)。

　哺乳類においては、MeCP2、MBD1、MBD2、MBD4の4つのメチル化されたDNAに結合するMBDタンパク質が存在する<ref name=Fournier2012><pubmed>22184333</pubmed></ref> (Fournier A et al., Brief Funct Genomics 11(3), 251-64, 2012)(図3)。他のMBD3、MBD5、MBD6の3つのタンパク質もこのMBDタンパク質ファミリーに属するが、メチル化されたDNAに結合しない<ref name=Hendrich2009><pubmed>12711219</pubmed></ref><ref name=Roloff2003><pubmed>12529184</pubmed></ref> (Hendrich B and Tweedie S Trends Genet 19, 269-77, 2009; Roloff TC, Ropers HH and Nuber UA BMC Genomics 4, 1, 2003)。

 

　MBDタンパク質は、MBDを介して対称的にメチル化されたCpGと結合するという共通性を有するが、それぞれのタンパク質は異なる機能ドメイン構造をもち、異なるタンパク質と相互作用する。このことは、MBDタンパク質が概して重複しない機能を持ち、多様な生物学的プロセスで役割を果たしていることを示唆している。しかしながら、MBDタンパク質の機能を解明するための広範な研究が行われてきたにもかかわらず、MeCP2以外の各MBD遺伝子を欠損させたマウスでは明らかな表現型が見られないためそれぞれのMBDタンパク質の生物学的意義はまだ明らかではない<ref name=Fournier2012><pubmed>22184333</pubmed></ref> (Fournier A et al., Brief Funct Genomics 11(3), 251-64, 2012)。

　MeCP2以外のMBDファミリーのうち、MBD1について中枢神経系機能との関連がいくつか報告されている。MBD1もMeCP2と同様にメチル化DNAに結合しクロマチン修飾タンパク質と相互作用することで転写抑制を媒介する<ref name=Fournier2012><pubmed>22184333</pubmed></ref> (Fournier et al., Brief Funct Genomics 11, 251-264, 2012)。ヒトにおいて、MBD1遺伝子の変異や遺伝子多型が孤発性の自閉スペクトラム症(ASD)患者に認められる<ref name=Li2005><pubmed>15967618</pubmed></ref> <ref name=Cukier2010><pubmed>19921286</pubmed></ref> (Li H et al., Brain Dev 27, 321-325, 2005; Cukier HN et al., Neurogenesis 11, 291-303, 2010)。MBD1を欠失したマウスは学習障害や不安亢進、社会行動異常などのASDに関連した行動異常を示すことが報告されている<ref name=Zhao2003><pubmed>12748381</pubmed></ref><ref name=Allan2008><pubmed>18385101</pubmed></ref> (Zhao et al., PNAS 100, 6777-6782, 2003; Allan et al., Hum Mol Genet 17, 2047-2057, 2008)。さらに、MBD1は成体神経幹細胞のニューロン分化を制御していることが明らかになっている<ref name=Jobe2017><pubmed>28100736</pubmed></ref> (Jobe EM et al., J Neurosci 37(3), 523-536, 2017)。

　上述のように、MeCP2の二つのスプライシングバリアントはN末端部分のみが異なる遺伝子構造をとる。MeCP2-e1は生体内でMeCP2-e2より豊富に存在する。MeCP2遺伝子は複数のポリ(A)付加部位を含むヒトとマウス間で高度に保存された3’-UTRを有しており、MeCP2のmRNA発現解析により、最も長い転写産物が脳において豊富に存在することが報告されている。この転写産物は胎生期に発現が高く、生後一過的に発現が減少するが、その後成体において再度発現が上昇するという特徴的な発現パターンを示す<ref name=Pelka2005><pubmed>15780747</pubmed></ref> (Pelka GJ et al., Genomics 85, 441-452, 2005)。MeCP2タンパク質の発現量は胎生期には低く、生後のニューロンの成熟に伴って高くなることが示されている<ref name=Kishi2004><pubmed>15519245</pubmed></ref> (Kishi N & Macklis Mol Cell Neurosci 27, 306-321, 2004)。

　MeCP2タンパク質は細胞内では核内に強く発現がみられ、特にヘテロクロマチンに豊富に存在することが知られている。最近の報告では、MeCP2が核内ヘテロクロマチンの液相様凝集(相分離; 特定タンパク質が濃縮された液滴を形成する現象)を促進しており、Rett症候群患者でみられるメチル化DNAへの結合能を失った変異ではこの相分離能を喪失することが報告されている<ref name=Li2020><pubmed>32698189</pubmed></ref> (Li CH et al., Nature 586(7829), 440-444, 2020)。

一方で、MeCP2はYB-1やDrosha複合体などのRNA結合タンパク質とも相互作用することが報告されており、細胞質にも存在し機能している<ref name=Young2005><pubmed>16251272</pubmed></ref><ref name=Tsujimura2015><pubmed>26344767</pubmed></ref><ref name=Nakashima2021><pubmed>34010654</pubmed></ref><ref name=Cheng2014><pubmed>24636259</pubmed></ref> (Young JI et al., PNAS 102, 17551-17558, 2005; Tsujimura K et al., Cell Rep 12, 1887-1901, 2015; Nakashima H et al., Cell Rep 35(7), 109124, 2021; Cheng TL et al., Dev Cell 28(5), 547-560, 2014)。

　MeCP2 mRNAは特に海馬、大脳皮質、小脳において高く発現しており、他の脳領域では中程度発現している。MeCP2タンパク質は成体脳の全領域に発現がみられるが前脳ニューロンにおいて特に高い発現が認められる<ref name=Jung2003><pubmed>12605461</pubmed></ref> (Jung BP et al., J Neurobiol 55(1), 86-96, 2003)。MeCP2はグリア細胞や末梢組織では発現していないと考えられていたが、近年の研究によりアストロサイトやミクログリアなどのグリア細胞にも低いながら発現が認められ、神経機能や疾患病態への寄与が報告されている<ref name=Albizzati2024><pubmed>38469559</pubmed></ref><ref name=Cao2024><pubmed>38289948</pubmed></ref> (Albizzati E et al., iScience 27(3), 109296, 2024; Cao Z et al., PNAS 121(6), e2320383121, 2024)。神経系以外の組織においてもユビキタスにMeCP2の発現は認められる<ref name=Vashi2021><pubmed>34230964</pubmed></ref> (Vashi N et al., Hum Mol Genet 30(22), 2161-2176, 2021)。

　MeCP2はメチル化DNAに結合するタンパク質として同定され、メチル化された遺伝子プロモーターに結合し標的遺伝子の発現を抑制する転写抑制因子(リプレッサー)として作用と考えられてきた。MeCP2タンパク質におけるMBDはメチル化されたCpGヌクレオチドに特異的に結合し、このMeCP2のCpGヌクレオチドに対する結合特異性は近接するA/Tリッチな配列に依存することが報告されている<ref name=Klose2005><pubmed>16137622</pubmed></ref> (Klose RJ et al., Mol Cell 19,667-678, 2005)。TRDはNIDを介してHDAC やmSin3A、NCoR-SMRT複合体などのコリプレッサー、SWI/SNFクロマチンリモデリング因子、DNAメチル基転移酵素Suv39H1等をリクルートすることにより転写抑制活性に寄与する<ref name=Nan1998><pubmed>9620804</pubmed></ref><ref name=Harikrishnan2005><pubmed>15696166</pubmed></ref><ref name=Kimura2003><pubmed>12473678</pubmed></ref> (Nan X et al., Nature 393, 386-389, 1998; Harikrishnan KN et al., Nat Genet 37,254-264, 2005; Kimura H&Shiota K J Biol Chem 278, 4806-4812, 2003)。C末端ドメインはnaked DNAやヌクレオソームへのMeCP2の結合を促進することやヌクレオソームの安定性に作用することが示されているが、機能的役割の全貌は明らかになっていない<ref name=Buschdorf2004><pubmed>14618241</pubmed></ref><ref name=Chua2024><pubmed>39164525</pubmed></ref> (Buschdorf JP & Stratling WH J Mol Med (Berl) 82, 135-143, 2004; Chua GNL et al., Nat Struct Mol Biol 31(11), 1789-1797, 2024)。しかしながら、多くのレット症候群患者においてC末端の欠失がみられること、MeCP2のC末端領域を欠失したモデルマウスは種々のレット症候群にみられる表現型を示すことからMeCP2の正常な機能とその破綻に起因する病態に重要なことは明白である。

　一方、MeCP2は近年の研究により転写抑制因子として作用するだけでなく、極めて多様な機能を有することが次々と明らかになっている。MeCP2は転写因子cAMP response element binding protein 1 (CREB1)と結合し転写活性化因子としても機能すること<ref name=Chahrour2008><pubmed>18511691</pubmed></ref> (Chahrour M et al., Science 320, 1224-1229, 2008)や、クロマチンループ構造の形成を介してクロマチン凝集を制御すること<ref name=Horike2005><pubmed>15608638</pubmed></ref> (Horike S et al., Nat Genet 37, 31-40, 2005)、RNA結合タンパク質であるY-box-binding protein 1 (YB-1)と相互作用し、mRNAのスプライシングを調節すること<ref name=Young2005><pubmed>16251272</pubmed></ref> (Young JI et al., PNAS 102, 17551-17558, 2005)、microRNA(miRNA)プロセッサーであるDrosha複合体と相互作用することでmiRNAプロセシング調節因子として作用すること<ref name=Tsujimura2015><pubmed>26344767</pubmed></ref><ref name=Nakashima2021><pubmed>34010654</pubmed></ref><ref name=Cheng2014><pubmed>24636259</pubmed></ref> (Tsujimura K et al., Cell Rep 12, 1887-1901, 2015; Nakashima H et al., Cell Rep 35(7), 109124, 2021; Cheng TL et al., Dev Cell 28(5), 547-560, 2014)が示されている。このようにMeCP2は様々なタンパク質パートナーと状況依存的に相互作用し、非常に多彩な機能を発揮していることが明らかになっている。これまでに40以上の結合タンパク質パートナーが同定されている<ref name=Lyst2015><pubmed>25732612</pubmed></ref> (Lyst MJ & Bird A Nat Rev Genet 16, 261-275, 2015)。加えて、MeCP2がヒドロキシメチル化シトシン(5hmC)にも結合することが示され、レット症候群患者でみられるMECP2変異体R133Cでは5hmCとの結合が減弱することから、この機能の病態への関与も示唆されている<ref name=Mellen2012><pubmed>23260135</pubmed></ref> (Mellen M et al., Cell 151, 1417-1430, 2012)。

　長らくMeCP2がメチル化DNA結合依存的な転写抑制因子として考えられていたことから、レット症候群の疾患病態はMeCP2により本来抑制されるべき標的遺伝子の異常な発現亢進が原因と考えられてきた。MeCP2機能欠損による標的遺伝子発現異常を調べるために、MeCP2KOマウスの脳組織を用いた転写プロファイリングが行われたが、予想外に大きな発現変化は検出されず病態に関連するような異常発現遺伝子の同定には至らなかった<ref name=Tudor2002><pubmed>12432090</pubmed></ref> (Tudor M et al., PNAS 99(24), 15536-15541, 2002)。

　MeCP2の転写抑制標的として、brain-derived neurotrophic factor (BDNF) <ref name=Chen2003><pubmed>14593183</pubmed></ref> (Chen WG et al., Science 302, 885-889, 2003)やFXYD domain containing ion transport regulator (FXYD1) <ref name=Deng2007><pubmed>17309881</pubmed></ref> (Deng V et al., Hum Mol Genet 16, 640-650, 2007)、insulin like growth factor binding protein (IGFBP3) <ref name=Itoh2007><pubmed>17278996</pubmed></ref> (Itoh M et al., J Neuropathol Exp Neurol 66, 117-123, 2007)遺伝子などが同定されている。BDNFはMeCP2の下流標的遺伝子であることが複数の研究により報告されているが、MeCP2KOマウスにおいて発現量の減少がみられること<ref name=Chang2006><pubmed>16446138</pubmed></ref> (Chang Q et al., Neuron 49, 341-348, 2006)から転写活性化の標的になっていることや間接的に影響を受けている可能性があり、MeCP2によってどのように発現が調節されているのか、病態にどのような寄与をしているのかは依然として不明瞭である。

　CREBを介したMeCP2の転写活性化因子としての標的は、ソマトスタチンやG protein regulated inducer of neurite outgrowth 1 (Gprin1)などが報告されている<ref name=Chahrour2008><pubmed>18511691</pubmed></ref> (Chahrour M et al., Science 320, 1224-1229, 2008)。MeCP2のスプライシング調節因子としての標的はNMDA型グルタミン酸受容体NR1サブユニットなどが挙げられる<ref name=Young2005><pubmed>16251272</pubmed></ref> (Young JI et al., PNAS 102, 17551-17558, 2005)。

　miRNAプロセシング調節因子の標的は、MeCP2-Drosha複合体の標的としてmiR-199aが同定されており、miR-199aを欠損したマウスはMecp2欠損マウスにみられる体重減少や短寿命などの表現型を模倣する<ref name=Tsujimura2015><pubmed>26344767</pubmed></ref> (Tsujimura et al., Cell Rep 2015)。さらに、このmiR-199aは下流のBMPシグナル因子Smad-1の発現抑制を介してMeCP2の神経幹細胞分化制御作用を媒介し、miR-199aの発現やBMPシグナル阻害剤処理はレット症候群患者iPS細胞由来神経幹細胞の分化やオルガノイド発達の異常を改善する<ref name=Nakashima2021><pubmed>34010654</pubmed></ref> (Nakashima H et al., Cell Rep 2021)。

　主に女児にみられる進行性の重篤な神経発達症である。レット症候群はX連鎖優性遺伝病で10,000〜15,000人に一人の頻度で発症する。患者は生後6〜18ヶ月程度までは正常に発達するが、その後それまでに獲得された言語能力や運動機能の退行がみられるようになる。患者は自閉傾向やてんかん、手もみ動作に代表される常同行動や精神遅滞、小頭症などの種々の神経学的症状を示す。神経系以外の症状としては、全身の成長遅延や骨形成不全などの特徴がみられる<ref name=Rett1966>'''Rett A., (1966)'''<br>Wien Med Wochenschr 116(37), 723-726,</ref><ref name=Hagberg1983><pubmed>6638958</pubmed></ref> (Rett A Wien Med Wochenschr 116, 723-726, 1966; Hagberg B et al., Ann Neurol 14, 471-479, 1983)。

 

　95%以上の古典的レット症候群症例にMECP2遺伝子の変異が認められる。変異のタイプはミスセンスやナンセンス、フレームシフト型など、300以上のヌクレオチド置換が報告されているが、特にT158M、R306C、R168X、R255X、R270Xの8つの変異が〜70%を占めることが示されている<ref name=Christodoulou2003><pubmed>12673788</pubmed></ref><ref name=Chahrour2007><pubmed>17988628</pubmed></ref> (Christodoulou J et al., Hum Mutat 21, 466-472, 2003; Chahrour M & Zoghbi HY Neuron, 56, 422-437, 2007)。

　MECP2の個体における機能と疾患病態を理解するために様々なモデルマウスが作製されてきた。最初に、BirdらとJaenishらそれぞれの独立したグループにより、エクソン3あるいはエクソン3と4を全身で欠失したMeCP2ノックアウト(KO, null; MeCP2-/y)マウスが作製された(<ref name=Chen2001><pubmed>11242118</pubmed></ref><ref name=Guy2001><pubmed>11242117</pubmed></ref>Chen RZ et al., Nat Genet 27(3), 327-331, 2001; Guy J et al., Nat Genet 27(3), 322-326, 2001)。これらのレット症候群モデルマウスはレット症候群患者の症状を模倣した表現型を示す。MeCP2-/yマウスは3-6週齢までは一見正常な発達がみられるが、それ以降には低活動性や振戦、歩行失調、イレギュラーな呼吸などの中枢性症状を示すようになり8-10までにほとんどの個体が致死となる。MeCP2-/yマウスの脳は、レット症候群患者の脳と同様に全体的な脳体積が小さく、個々のニューロンの細胞体も小さい。また、海馬を含めた脳の種々の領域においてニューロンが密に配置されるという組織学的な特徴を示す。一方で、脳全体の顕著な構造的異常は確認されない。MeCP2-/yヘテロ(Hetero; MeCP2+/-)雌マウスは患者と同様に全組織中においてX染色体のランダムな不活性化により正常MeCP2を発現する細胞とMeCP2を欠失した細胞が混在しておりレット症候群様の行動異常を示すが、全ての細胞でMeCP2を欠失しているMeCP2-/yヘミ(Hemi)雄よりも遅い時期に表現型が観察されるようになる。さらにNestin-Creドライバーを用いて作製された中枢神経系特異的MeCP2欠損マウスは全身性のMeCP2-/yマウスと類似した表現型がみられることから、脳・神経系におけるMeCP2の欠損はレット症候群の病態を引き起こすのに十分であることが証明されている。加えて、Calcium-calmodulin-dependent kinase II (CaMKII)-Creドライバーを用いて作製された最終分裂後のニューロンに特異的なMeCP2欠損マウスにおいても時期は遅延するものの類似の表現型がみられることから成熟ニューロン機能におけるMeCP2の重要性が確認されている(<ref name=Chen2001><pubmed>11242118</pubmed></ref>Chen RZ et al., Nat Genet 27(3), 327-331, 2001; <ref name=Gemelli2006><pubmed>16199017</pubmed></ref>Gemelli T et al., Bio Psychiatry 59(5), 468-476, 2006)。特筆すべきことに、MeCP2欠失マウスにおいて神経系細胞およびニューロンにMeCP2を再発現させると、上述のMeCP2欠失マウスの表現型が改善されることが示されている(<ref name=Guy2001><pubmed>11242117</pubmed></ref><ref name=Giacometti2007><pubmed>17267601</pubmed></ref>Guy J et al., Science 315(5815), 1143-1147, 2007; Giacometti E et al., PNAS 104(6), 1931-1936, 2007)。これらの結果は進行性の重篤な神経疾患を治療することが可能であることを示唆する臨床的にも重要な知見である。

　患者の神経生理学的研究から、レット症候群脳の皮質において異常な体性感覚誘発電位や脳波などの興奮性の変質が報告されている(<ref name=Moser2007><pubmed>17275660</pubmed></ref>Moser SJ, Weber P, & Lutschg J Pediatr Neurol 36, 95-100, 2007)。MeCP2-/yマウスやMeCP2308/yマウスの皮質スライスでは、長期増強(Long-term potentiation: LTP)の減少がみられること(<ref name=Asaka2006><pubmed>16087343</pubmed></ref>Asaka Y et al., Neurobiol Dis 21, 217-227, 2006)、MeCP2-/yマウスの皮質においては興奮性シナプス伝達の減少と抑制性シナプス伝達の上昇が示されている(<ref name=Dani2005><pubmed>16116096</pubmed></ref>Dani VS et al., PNAS 102, 12560-12565, 2005)。また、MeCP2-/yマウス由来の培養海馬ニューロンは自発的な興奮性シナプス伝達の頻度の減少と興奮性シナプス密度の減少を示すことが報告されている(<ref name=Nelson2006><pubmed>16581518</pubmed></ref><ref name=Chao2007><pubmed>17920015</pubmed></ref>Nelson ED et al., Curr Biol 16, 710-716, 2006; Chao HT et al., Neuron 56(1), 58-65, 2007)。これらの報告から、MeCP2は主に興奮性シナプス伝達と抑制性シナプス伝達のバランス制御に重要な役割を果たしていることが示唆される。

　様々な脳領域や細胞種特異的にMecp2を欠損させたコンディショナルノックアウト(CKO)マウスが作製され、種々の脳部位および神経サブタイプ機能におけるMeCP2の機能が個体レベルで明らかにされてきている。扁桃体特異的コンディショナルノックアウトマウスは、不安様行動の増加と恐怖学習の低下がみられる(<ref name=Adachi2009><pubmed>19339616</pubmed></ref>Adachi M et al., J Neurosci 29(13), 4218-4227, 2009)。視床下部特異的コンディショナルノックアウトマウスは、不安様行動の増加や、攻撃性の上昇、食欲過剰、肥満を示す(<ref name=Fyffe2008><pubmed>18817733</pubmed></ref>Fyffe SL et al., 59(6), 947-958,2008)。チロシン水酸化酵素 (tyrosine hydroxylase, TH)発現ドーパミンおよびノルアドレナリンニューロン特異コンディショナルノックアウトマウスにおいては、ドーパミンおよびノルアドレナリン量の減少と運動機能障害がみられる(<ref name=Samaco2009><pubmed>20007372</pubmed></ref>Samaco RC et al., PNAS 106, 21966-21971, 2009)。PC12 ETS factor 1 (PET1)発現セロトニンニューロン特異的にMecp2を欠損したマウスは、セロトニン量の減少と攻撃性の上昇を示す(<ref name=Samaco2009><pubmed>20007372</pubmed></ref>Samaco RC et al., PNAS 106, 21966-21971, 2009)。広範な抑制性ニューロンにおけるMecp2の欠損は、短命や呼吸障害、運動機能障害、反復行動、低活動、異常な社会性の上昇、感覚運動遮断の異常、学習障害などレット症候群様の多くの表現型を示す(<ref name=Chao2010><pubmed>21068835</pubmed></ref>Chao HT et al., Nature 468(7321), 263-9,2010)。

　一方で、前脳の抑制性ニューロンにおけるMecp2の欠損は、運動機能障害、反復行動、低活動、異常な社会性の上昇、感覚運動遮断の異常、学習障害などいくつかのレット症候群様表現型を示すことが明らかにされている(<ref name=Chao2010><pubmed>21068835</pubmed></ref>Chao HT et al., Nature 468(7321), 263-9,2010)。抑制性ニューロンサブタイプにおけるMeCP2の機能についても研究が行われており、パルアルブミン発現抑制性ニューロンニューロン特異的にMecp2を欠損したマウスでは運動機能や感覚情報処理、学習、社会性の異常がみられ、ソマトスタチン発現抑制性ニューロン特異的にMecp2を欠損したマウスにおいてはてんかんや常同運動がみられることが示されている(<ref name=ItoIshida2015><pubmed>26590342</pubmed></ref>Ito-Ishida A et al., Neuron 88(4), 651-8, 2015)。

　実際のレット症候群患者にみられるMeCP2変異を模倣するモデルマウスが作製されている。レット症候群患者で高頻度にみられるC末端欠失型ナンセンス変異体を模倣したMeCP2R168X/yマウス、MeCP2R255X/yマウス、MeCP2308/yマウスは、運動機能低下、低活動、社会行動低下、不安様行動などのレット症候群患者でみられる多くの表現型を示す(<ref name=Wegener2014><pubmed>25541993</pubmed></ref><ref name=Pitcher2015><pubmed>25634563</pubmed></ref><ref name=Shahbazian2002><pubmed>12160743</pubmed></ref>Wegener E et al., PLoS One 9(12), e115444, 2014; Pitcher MR et al., Hum Mol Genet 24(9), 2662-72, 2015; Shahbazian M et al., Neuron 35(2), 243-54, 2002)。点変異型ミスセンス変異を模倣したモデルマウスも作製されており部分的なレット症候群表現型を示すことが報告されている(<ref name=Goffin2011><pubmed>22119903</pubmed></ref>Goffin D et al., Nat Neurosci 15, 274-283, 2011)。興味深いことに、Mecp2のN末端とC末端を欠失したMBDとNIDを含む短いMeCP2(正常タンパク質のおよそ半分の長さ)を発現するマウスはほぼ正常に近い表現型を示し、Mecp2欠損マウスにこの短いMecp2を導入することにより表現型の改善がみられることも報告されている(<ref name=Tillotson2017><pubmed>29019980</pubmed></ref>Tillotson R et al., Nature 550(7676), 398-401, 2017)。

　またレット症候群やMECP2重複症候群の霊長類モデルが作製されており(<ref name=Chen2017><pubmed>28525759</pubmed></ref><ref name=Cai2020><pubmed>32269107</pubmed></ref>Chen Y et al., Cell 169(5), 945-955, e10, 2017; Cai DC et al., J Neurosci 40(19), 3799-3814, 2020)、今後は霊長類モデルを用いた研究によりMECP2機能異常に起因するヒト疾患病態のさらなる理解や治療法開発が期待される。

　MECP2重複症候群はX染色体上にあるMECP2遺伝子を含む領域の重複により引き起こされ、男児に発症する。出生男児10万人に一人の頻度で発症することが報告されている(<ref name=GiudiceNairn2019><pubmed>30756435</pubmed></ref>Giudice-Nairn P et al., J Paediatr Child Health 55(11), 1315-1322, 2019)。同じアレル上で重複することが多くみられるが転座例も報告されている。臨床症状として、重度の知的障害、運動発達障害、自閉的行動特性、筋緊張低下、反復性の感染症、薬剤抵抗性のてんかんを特徴とする。ほとんどの患者でてんかんが認められ、種々の異常脳波が神経生理学的な異常として報告されている(<ref name=Lorenzo2021><pubmed>34486423</pubmed></ref><ref name=Cani2022><pubmed>35520952</pubmed></ref>Lorenzo J et al., J Child Neurol 36(12), 1086-1094, 2021; Cani I et al., Epilepsy Behav Rep 19, 100541, 2022)。

　ヒトMECP2遺伝子をゲノムに挿入しMeCP2を正常量より多く発現するMECP2重複症候群モデルマウスも作製されており、MECP2重複患者にみられるような異常脳波などの神経生理学的表現型の一部を模倣することが報告されている(<ref name=Collins2004><pubmed>15351775</pubmed></ref>Collins AL et al., Hum Mol Genet 13(21), 2679-89, 2004)。

　治療薬としては、過剰なMeCP2の発現を抑制するようにデザインされたアンチセンスオリゴヌクレオチド(ASO)がMECP2重複モデルマウスの表現型を改善することが示され(<ref name=Shao2021><pubmed>33658357</pubmed></ref><ref name=Sztainberg2015><pubmed>26605526</pubmed></ref>Shao Y et al., Sci Transl Med 13(583), eaaz7785, 2021; Sztainberg Y et al., Nature 528(7580), 2015)、それらの結果を基に現在臨床第1/2相試験が実施されている(ClinicalTrial.gov identifier: NCT06430385)。

　MECP2遺伝子の異常はレット症候群やMECP2重複症候群だけでなく、種々の精神・神経疾患患者にも認められる。これまでに、患者のゲノム解析によりMECP2遺伝子の異常が自閉スペクトラム症(Autism spectrum disorder: ASD)、学習障害(Intellectual disability: ID)、統合失調症、双極性障害など多様な疾患の発症に寄与することが示されている(<ref name=Chahrour2007><pubmed>17988628</pubmed></ref><ref name=Wen2017><pubmed>28785396</pubmed></ref>Chahrour M & Zoghbi HY Neuron, 56(3), 422-437, 2007; Wen Z et al., Mol Autism 8, 43, 2017; Cohen D et al., Am J Psychiatry 159(1), 148-149, 2002)。今後、精神・神経疾患患者の全ゲノムシークエンス(Whole Genome Sequence: WGS)の普及が進むことによりMECP2遺伝子異常と広範な疾患病態とのさらなる関連の解明が期待される。